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7544 次 qPCR擴(kuò)增曲線的問(wèn)題綜述與解決方法總結(jié) 2021-12-1
大家好！首先跟大家做一個(gè)自我介紹：我是擴(kuò)增曲線，來(lái)自熒光定量PCR，是用于描述qPCR動(dòng)態(tài)進(jìn)程的曲線，我有兩種形態(tài)，一種是線性圖譜：橫坐標(biāo)是循環(huán)數(shù)，縱坐標(biāo)是熒光強(qiáng)度值；另一種是對(duì)數(shù)圖譜：橫
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1681 次 Azure Cielo™實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)在檢測(cè)低拷貝端粒基因的應(yīng)用 2021-11-24
我們都知道在實(shí)時(shí)定量PCR（qPCR）中，可以通過(guò)Cq值和標(biāo)準(zhǔn)曲線得出樣本的初始拷貝數(shù)。但Cq值與樣品中靶標(biāo)的拷貝數(shù)有關(guān)，也會(huì)受到PCR反應(yīng)的效率和儀器檢測(cè)靈敏度的影響。高靈敏度的儀器可以減少檢
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6707 次 一文攬盡：熒光定量PCR擴(kuò)增曲線哪個(gè)階段最重要 2021-11-17
qPCR擴(kuò)增曲線一般分成四個(gè)階段：基線期、指數(shù)期、線性期和平臺(tái)期。那么每個(gè)階段PCR產(chǎn)物量的變化都有什么區(qū)別呢？哪個(gè)階段最重要呢？小編這就一一道來(lái)。基線期PCR起始時(shí)，剛開(kāi)始前幾個(gè)循環(huán)的熒光
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2313 次 針對(duì)新手專(zhuān)用PCR原理講解與分析 2021-11-9
什么是實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）?在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過(guò)Cq值和標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)起始模板進(jìn)行定量分析的方法。一．使DNA產(chǎn)物發(fā)出熒光的常用標(biāo)記方
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1874 次 Azure Cielo™ 實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)在快速可靠地檢測(cè)新冠病毒的應(yīng)用 2021-11-3
在應(yīng)對(duì)病毒性大流行疾病時(shí)，為了有效控制病毒傳播和減少感染人群，快速且可靠的診斷是至關(guān)重要的。那么目前檢測(cè)COVID-19的 "黃金標(biāo)準(zhǔn) "依賴(lài)于一種成熟的技術(shù)，即反轉(zhuǎn)錄定量聚合酶鏈反
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4715 次 新手須知的qPCR操作技巧詳解（下篇） 2021-8-26
上一篇文章跟大家介紹了qPCR實(shí)驗(yàn)中引物設(shè)計(jì)及加樣的相關(guān)操作技巧，今天我們?cè)俑蠹曳窒砥渌膶?shí)用技巧，這些入門(mén)級(jí)知識(shí)一定要掌握牢固哦。1、陰性對(duì)照的技巧：陰性對(duì)照一般是指用水代替模板的反
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19783 次 MeRIP-qPCR方法原理、結(jié)果含義、展示方法及應(yīng)用細(xì)談 2021-8-10
m6A等RNA修飾的主要研究手段是通過(guò)MeRIP方法對(duì)發(fā)生修飾的片段進(jìn)行富集，其后進(jìn)行高通量測(cè)序分析修飾位點(diǎn)。而無(wú)論是一篇僅展示修飾位點(diǎn)分布特點(diǎn)的譜學(xué)文章，還是深入研究修飾調(diào)控基因表達(dá)機(jī)制的文
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2929 次 PCR Efficiency在線分析工具在預(yù)測(cè)PCR擴(kuò)增效率的使用 2021-7-30
目前已開(kāi)發(fā)多種工具可以進(jìn)行PCR引物的設(shè)計(jì)，但大多數(shù)工具只考慮避免發(fā)夾結(jié)構(gòu)形成、3'末端核苷酸的選擇、引物解鏈溫度等問(wèn)題，并沒(méi)有考慮內(nèi)在擴(kuò)增子的特征以及沒(méi)有預(yù)測(cè)給定擴(kuò)增子和引物對(duì)的P
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4881 次 新手須知的qPCR操作技巧（上篇） 2021-7-30
實(shí)時(shí)熒光定量 PCR（qPCR）自問(wèn)世以來(lái)，就受到了廣大生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)工作者和醫(yī)院檢驗(yàn)工作者的極大關(guān)注，使得該技術(shù)得到了很快的普及。雖然qPCR技術(shù)目前應(yīng)用方向十分廣泛，但是仍碰到很多用戶(hù)在實(shí)驗(yàn)
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54170 次 熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)流程中常見(jiàn)的陰性對(duì)照與陽(yáng)性對(duì)照介紹 2021-7-15
什么鬼？實(shí)驗(yàn)結(jié)果又不理想，Ct值怎么又這么大呢？是哪一步出現(xiàn)了問(wèn)題呢？哎哎哎，怎么沒(méi)有擴(kuò)增曲線呢？在您看到熒光定量 PCR 實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，是不是也發(fā)出過(guò)這樣的疑問(wèn)呢？總感覺(jué)哪個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟出現(xiàn)了
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8406 次 qPCR性能分析的四大要素-效率、線性動(dòng)態(tài)范圍、檢測(cè)限和精密度 2021-6-28
MIQE指南中明確提出，進(jìn)行qPCR實(shí)驗(yàn)時(shí)必須測(cè)定以下檢測(cè)性能特點(diǎn)：PCR的效率、線性動(dòng)態(tài)范圍、LOD和精密度。1、PCR的效率：強(qiáng)大和精確的qPCR測(cè)定通常具有高效率。在報(bào)告目的基因相對(duì)于參照基因的mR
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4063 次 實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物設(shè)計(jì)原則中擴(kuò)增子大小對(duì)qPCR產(chǎn)量影響的應(yīng)用 2021-6-11
一般情況下，實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物設(shè)計(jì)原則中會(huì)提到擴(kuò)增子大小對(duì)實(shí)時(shí)熒光定量PCR的擴(kuò)增效率有一定作用。所以通常建議使用相對(duì)較短的擴(kuò)增子長(zhǎng)度，范圍為50到150個(gè)堿基對(duì)（bp）。由于小片段不太容易
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3697 次 MIQE中核酸質(zhì)量控制環(huán)節(jié)的操作簡(jiǎn)易說(shuō)明 2021-6-3
RNA樣本：比較不同的樣本時(shí)，應(yīng)保證各樣本中含有大致相同量的RNA，因此需要對(duì)所提取的RNA進(jìn)行定量。常用的定量方法包括：分光光度法、熒光染料檢測(cè)、瓊脂糖凝膠電泳、毛細(xì)管凝膠電泳和3'：5
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4288 次 超敏一步巢式Taqman qPCR熒光核酸檢測(cè)技術(shù)的機(jī)理及應(yīng)用優(yōu)勢(shì) 2021-3-23
巢式PCR具有很高的靈敏度和特異性，但傳統(tǒng)的巢式PCR采用兩對(duì)引物，通過(guò)兩輪PCR，進(jìn)行目標(biāo)產(chǎn)物的擴(kuò)增。這種操作的不便性，使得其高靈敏度的特性難以應(yīng)用到快速檢測(cè)和臨床診斷中。在單管巢式PCR的
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2022 次 無(wú)需ROX校準(zhǔn)的Azure Cielo™ Real-Time PCR光學(xué)系統(tǒng)的應(yīng)用 2021-1-29
ROX是一種廣泛使用的惰性熒光染料，通常添加到qPCR反應(yīng)液中以校正熒光信號(hào)。然而，隨著熒光技術(shù)在儀器中的發(fā)展，比如在Azure Cielo™實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)，為了標(biāo)準(zhǔn)化而單獨(dú)使用染料的步驟
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2533 次 ac4C榮登Nature-RNA修飾研究大有可為 2020-10-20
RNA修飾是表觀遺傳學(xué)中調(diào)控轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)的關(guān)鍵過(guò)程，目前對(duì)m6A RNA修飾的研究已進(jìn)行的如火如荼，但除了m6A以外仍有多種RNA修飾類(lèi)型參與調(diào)控轉(zhuǎn)錄后的基因表達(dá)，其中包括m1A、m5C、m7G、2&rsquo
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1711 次 去甲基化酶ALKBH5在胰腺癌中的應(yīng)用 2020-7-9
文章導(dǎo)讀表觀遺傳修飾如m6A甲基化在腫 瘤的發(fā)生和發(fā)展中起到重要作用。而甲基化酶對(duì)ai癥的影響也受到廣 泛關(guān)注。其中去甲基化酶ALKBH5已被報(bào)道過(guò)能通過(guò)維持乳腺ai細(xì)胞的干細(xì)胞性而促進(jìn)腫 瘤的形
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1901 次 PCR疑難問(wèn)題粉碎機(jī)：逆轉(zhuǎn)錄PCR的操作要點(diǎn)與方法 2020-6-30
【前情回顧】PCR疑難問(wèn)題粉碎機(jī)（一）——終點(diǎn)PCR 【前情回顧】PCR疑難問(wèn)題粉碎機(jī)（二）——熒光定量PCR 逆轉(zhuǎn)錄 PCR（Reverse TranscriptionPCR, RT-PCR）是一種以 RN
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2644 次 PCR疑難問(wèn)題解答第二篇：熒光定量PCR 2020-6-16
【前情回顧】PCR疑難問(wèn)題粉碎機(jī)（一）——終點(diǎn)PCR 實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative PCR, qPCR）通過(guò)對(duì)PCR擴(kuò)增反應(yīng)中的每一個(gè)循環(huán)產(chǎn)物熒光信號(hào)的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)從而實(shí)現(xiàn)對(duì)起始模板的定性
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946 次 30分鐘的精確定量-染料法熒光定量PCR 2020-5-14
【前情回顧】 【1】PCR試劑選擇困難癥？其實(shí)可以很簡(jiǎn)單！點(diǎn)擊了解 【2】高分辨率熔解曲線（HRM）分析預(yù)混Mix（PCR），用于基因篩查？點(diǎn)擊了解 【3】飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOF）法SNP分析（P
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