LiveTissue 復蘇試劑盒使用說明書
活腫瘤組織復蘇試劑盒(LT2602)
組織復蘇液:
No.1 復蘇液 1 (T1) ………………… 1X30ml 管
No.2 復蘇液 2 (T2) ………………… 1X10ml 管
No.3 復蘇液 3 (T3) ……………… 1X10ml 管
No.4 復蘇液 4 (T4) ……………… 1X10ml 管
自備材料:
1. 有齒鑷 2. 平口鑷 3. 無菌液氮 4. 無菌液氮盒 5. 秒表或計時器 6. 100mm 培養皿 X3 7. 水浴鍋
操作步驟:
a. 水浴加熱并維持復蘇液 1 為 37℃,復蘇液 2、3、4 為 26℃; 注意:在后續使用復蘇液 1 時維持液溫為 37℃,復蘇液 2、3、4 時維持液溫為 26℃, 有利于提高組織復蘇后的存活率。
b. 使用有齒鑷在液氮中旋開組織凍存管并取出組織支架;
c. 迅速將組織支架沉浸入 37℃的復蘇液 1 ,并不斷輕搖 T1 管,待組織切 片從組織支架上脫落后,取出支架,讓組織切片浸泡 3min;
d. 將 T1 管中的液體及組織切片全部倒入 100mm 培養皿中,使用平口鑷將組 織切片移入 T2 管中的 10ml 復蘇液 2 中,26℃,5min;
e. 將 T2 管中的液體及組織切片全部倒入 100mm 培養皿中,使用平口鑷將組 織切片移入 T3 管中的 10ml 復蘇液 3 中,26℃,10min;
f. 將 T3 管中的液體及組織切片全部倒入 100mm 培養皿中,使用平口鑷將組 織切片移入 T4 管中的 10ml 復蘇液 4 中,26℃,10min,即獲得復蘇后 的腫瘤組織;
g. 用生理鹽水沖洗后即可移植于免疫缺陷小鼠體內建立 PDX 模型,或用于 其他研究。 注意:盡量減少組織切片從一種復蘇液移入另一種復蘇液之間的操作時間。