細胞培養是生命科學研究中常見的實驗。不像其它常用的實驗方法，細胞培養是一個動態的連續過程，細胞通常會對操作失誤或污染物有所反應，這些反應往往表現出不正常的細胞狀態或培養基外觀。如果受到支原體污染時，細胞形態較之無明顯變化，極易被忽視，往往直到污染非常嚴重時才能發現。受污染的細胞膜上可能有幾百個支原體，這些支原體競爭營養并釋放有毒的代謝產物，嚴重影響實驗結果。

研究表明，至少二十多種支原體能污染細胞，其中最常見的有：口腔支原體（M.orale）、精氨酸支原體（M.arginini）、豬鼻支原體（M.hyorhinis）、發酵支原體（M. fermentans）、人型支原體（M. hominis）、唾液支原體（M.salivarium）、肺支原體（M.pulmonis）和梨支原體（M.pirum）等。培養細胞的支原體污染率在4%-92%不等，其污染來源包括工作環境、操作者本身（一些支原體是人體的正常菌群）、培養基、血清、細胞交叉污染、實驗器材和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。

確認細胞培養過程中出現問題的潛在原因是一項困難且耗時的任務，在細胞培養中，任何突然的變化都應該被懷疑，同時良好的試驗規范和定期檢測支原體污染也十分必要。支原體檢測的方法有很多種，如直接培養、DNA熒光染色、ELISA和PCR法等。

GMyc-PCR支原體檢測試劑盒主要采用PCR方法對各種生物材料（如細胞培養物、實驗動物分泌物、動物血清等）支原體感染的檢測。它綜合了幾個優勢：靈敏、特異、快速并且可以用直接用細胞培養上清液檢測。本制品通過PCR方法檢測培養細胞等生物材料中的支原體，所用引物為根據支原體16S-23S rRNA序列保守區域設計，只特異性擴增支原體DNA，檢出靈敏度與特異性均較高。PCR擴增及電泳分析只需數個小時，操作方便簡單。
 

注意事項

1）使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。
2）操作時應盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽性；整個檢測過程中，反應體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應分區域進行，以避免交叉污染。
3）實驗時，試劑盒組分中的試劑使用前應充分融化并混勻（混勻時禁止激烈振蕩，只需要進行上下倒置多次進行混勻）。
4）反應管中加好所有的試劑后，應盡快上PCR儀進行擴增，以免形成過多的二聚體。
5）細胞培養物中含有青霉素和鏈霉素等抗生素不會影響本品的檢測結果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度，建議細胞在不含青霉素和鏈霉素等抗生素中進行培養2-3天后送樣檢測。
6）為了您的健康，實驗操作時請穿實驗服和帶一次性手套。
7）本產品僅作科研用途！

 

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