簡要描述
Rhod-2三鈉鹽（Rhod-2 Trisodium Salt）是一種水溶性、較高親和力的可見光激發(fā)的鈣離子熒光探針。類似于Fluo-3或Fluo-4，其激發(fā)和發(fā)射光譜不會隨著Ca2+濃度變化發(fā)生明顯的遷移，熒光信號一旦與Ca2+結(jié)合后會增強(qiáng)，Ex/Em=549/578 nm。Rhod-2三鈉鹽不具細(xì)胞膜滲透性，可通過微注射或劃痕標(biāo)記加載進(jìn)入細(xì)胞。
參數(shù)信息
英文名稱：Rhod-2 Trisodium Salt
中文名稱：Rhod-2三鈉鹽
分子式：C40H39N4Na3O11
分子量：820.73
狀態(tài)：暗紅色固體
Kd（Ca2+結(jié)合）：570NM
Ex/Em：549/578
溶解性：溶于水
純度：≥95%
儲存條件：-20℃避光干燥
使用方法與注意事項
【溶解與配置】：
推薦用純水溶解，配制成儲存液（如1-5 mM）后分裝保存。
實驗時需添加0.04% Pluronic F-127（防止探針聚集）和有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑（如丙磺舒，0.5-1 mM）以提高加載效率。
【加載步驟】：
去除細(xì)胞培養(yǎng)基中的血清和酚紅（避免干擾自熒光）。
用緩沖液（如HHBS）洗滌細(xì)胞后，加入Rhod-2 Trisodium Salt工作液（終濃度4-5 μM）。
37℃孵育30-60分鐘，再用緩沖液洗滌去除殘留探針。
【檢測設(shè)備】：
可用于激光共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀或熒光酶標(biāo)儀，需使用549 nm激發(fā)濾片和578 nm發(fā)射濾片。
【注意事項】：
- 儲存條件：建議 - 20℃避光干燥保存，AM酯需防潮。
- 加載方法：鈉鹽需物理導(dǎo)入（如顯微注射），避免酯酶抑制劑干擾。
- 信號校準(zhǔn)：建議結(jié)合鈣離子載體（如離子霉素）進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)Ca²⁺濃度的定量分析。