產品簡介：
過氧化氫檢測試劑盒（Hydrogen Peroxide Assay Kit）可以用于培養細胞或組織內過氧化氫水平的測定，也可以用于培養細 胞的上清或血清、尿液、血漿或其它生物體液中的過氧化氫濃度的測定。
過氧化氫是一種活性氧代謝的副產物，在許多氧化應急反應中過氧化氫都是一種關鍵的調節因子。過氧化氫可以激活NF-κB等因子，這些過氧化氫相關的信號途徑和哮喘、炎癥性關節炎、動脈硬化以及神經退行性疾病等許多疾病相關。過氧化氫也和細胞凋亡、細胞增殖等密切相關。
本試劑盒通過過氧化氫氧化二價鐵離子產生三價鐵離子，然后和xylenol orange在特定的溶液中形成紫色的產物，從而實現對過氧化氫濃度的測定。本試劑盒經過改良配方，可以檢測低達1微摩爾/升的過氧化氫。
本試劑盒方便快捷，通常10-20個樣品可以在40-60分鐘內測定完畢。
本試劑盒可以檢測150個樣品。
包裝清單：
過氧化氫檢測試劑 15 ml
過氧化氫標準溶液（1M） 1 ml
過氧化氫檢測裂解液 50 ml
說明書 1 份
保存條件：
-20℃保存，一年有效。其中過氧化氫標準溶液需避光保存。
注意事項：
一些干擾氧化還原的試劑或在酸性條件下呈紫色或接近的試劑會對過氧化氫的檢測產生干擾，需盡量避免。
如果樣品中含有外加的較高濃度的鐵鹽，會干擾測定。但普通培養基、血清等樣品中含有的微量的鐵鹽不會干擾測定。
所測得的標準曲線盡管在一定的濃度范圍內接近直線，但整個標準曲線不是直線。
測定時需可以測定A560的酶標儀一臺（測540-570nm也可以）或可以測定微量樣品的分光光度計一臺。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1. 樣品測定的準備：
(1) 細胞或組織樣品的制備
按照每六孔板一個孔（大約相當于100萬個細胞）加入200微升裂解液的比例加入裂解液，裂解細胞。離心取上清，即可用于后續的測定。（如果不立即測定，可以在-20度凍存）組織樣品可以勻漿后，取少量勻漿參照細胞裂解的方法加入適當體積的裂解液以充分裂解。同樣離心取上清用與后續的測定。以上操作需在4℃或冰上操作。
(2) 培養細胞上清液樣品的制備
培養細胞的上清液可以直接用于后續的測定。
(3) 血清、血漿或尿液樣品的準備：
配制50mM磷酸緩沖液，pH為6.0。用pH為6.0的50mM磷酸緩沖液把樣品稀釋50倍。例如4微升樣品稀釋到196微升pH為6.0的50mM磷酸緩沖液中。稀釋后即可用于后續的測定。
2. 標準曲線測定的準備：
樣品在什么溶液中標準品也需用用什么溶液稀釋，這樣可以減小誤差。例如對于細胞樣品，標準品宜用過氧化氫檢測裂解液稀釋，對于培養細胞的上清液樣品，標準品宜用相應的細胞培養液稀釋。標準溶液可以稀釋成1、3、10、30、100微摩爾/升，或1、2、5、10、20、50、100微摩爾/升，初次測定后知道樣品的濃度范圍后可以對標準品在樣品濃度范圍附近密集測定。
3. 過氧化氫濃度的測定：
（1） 把過氧化氫檢測試劑在冰上或冰水浴上融解。
（2） 在檢測孔或檢測管內加入50微升樣品或標準品。
（3） 在每個孔內加入100微升過氧化氫檢測試劑。
（4） 輕輕振蕩或敲打混勻，室溫(15-30℃)放置30分鐘。然后立即測定A560。如測A560有困難，波長可以選擇540-570nm。
（5） 根據標準曲線計算出樣品中過氧化氫的濃度。
注意：如果樣品中過氧化氫的濃度過高，可以適當稀釋后再測定。如果樣品中過氧化氫的濃度過低，可以把樣品的體積改為使用100微升，同時標準品也使用100微升，而檢測試劑仍然使用100微升。這樣可以提高檢測的靈敏度，但缺點是樣品需要消耗100微升。
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