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EMSA突變探針-按需制備
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國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口:國(guó)產(chǎn)半年訪問:24
產(chǎn)地/品牌:碧云天生物技術(shù)研究所產(chǎn)品類別:細(xì)胞生物學(xué)試劑
規(guī)       格:GSREQM  105pmol 最后更新:2018-4-26
貨       號(hào):
CAS   號(hào):
參考報(bào)價(jià):568.00元
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

Ø EMSA突變探針-按需制備是指按照用戶的要求制備的用于EMSA(也稱gel shift)研究的雙鏈oligonucleotide的突變體?梢宰

為非突變探針的的陰性對(duì)照,用于EMSA結(jié)合反應(yīng)中突變探針的冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)。這個(gè)突變的雙鏈寡核苷酸含有用戶指定的序列。
Ø EMSA突變探針中與轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn)發(fā)生了突變,從而使轉(zhuǎn)錄因子無(wú)法和該突變探針結(jié)合。在探針冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)中,正常的標(biāo)記

探針和轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合的條帶會(huì)被抑制;而在突變探針冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)中,正常的標(biāo)記探針和轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合的條帶不會(huì)被抑制。參
考下圖。

圖1. 一個(gè)典型的EMSA/Gel- Shift分析圖
1, 陰性對(duì)照反應(yīng)(標(biāo)記探針);2, 常規(guī)反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標(biāo)記探針);3, 探針冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)(含激活的
目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標(biāo)記探針+標(biāo)記探針100倍量的未標(biāo)記探針);4, 突變探針的冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的
核蛋白+標(biāo)記探針+標(biāo)記探針100倍量的未標(biāo)記突變探針);5, Super-shift反應(yīng)(含激活的目的轉(zhuǎn)錄因子的核蛋白+標(biāo)記探
針+目的轉(zhuǎn)錄因子的特異抗體)。

Ø 一個(gè)包裝的突變探針,即105pmol,如果用于突變探針的冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)(cold competition),可以進(jìn)行30-60個(gè)突變探針的冷競(jìng)爭(zhēng)
反應(yīng)。




包裝清單:

EMSA突變探針-按需制備(1.75pmol/微升) 60微升
說(shuō)明書 1份




保存條件:

-20℃保存,一年有效。



注意事項(xiàng):

Ø 避免加熱到40℃以上,溫度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致雙鏈DNA解聚成單鏈。而單鏈無(wú)法用于EMSA研究。


Ø 對(duì)于EMSA的詳細(xì)操作可以參考我們的EMSA試劑盒的使用說(shuō)明。


Ø 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。


使用說(shuō)明:


用于突變探針的冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng),可以參考如下反應(yīng)體系:



突變探針的冷競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng):

Nuclease-Free Water
4微升
EMSA/Gel-Shift結(jié)合緩沖液(5X)
2微升
細(xì)胞核蛋白或純化的轉(zhuǎn)錄因子
2微升
未標(biāo)記的突變探針 1微升
標(biāo)記好的探針
1微升
總體積
10微升

如果使用更大體積的未標(biāo)記的突變探針,Nuclease-Free Water的體積就要相應(yīng)減少,使總體積保持不變。


 

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