內參即內部參照（Internal Control），類似于熒光定量實驗的內參基因，對于哺乳動物細胞表達來說一般是指由看家基因編碼表達的蛋白(Housekeeping Proteins)，它們在不同組織和細胞中的表達相對恒定，常用它作為檢測目的蛋白表達水平變化時來做參照物。

1. 內參抗體的功能：

（1）檢測整個WB流程是否正常

（2）檢測基因表達產物是否正確

（3）比較表達產物微量的相對變化

（4）評價各個上樣孔內蛋白的總量是否基本一致

2. 內參抗體的選擇：

（1） 樣本種屬來源

l 哺乳動物的組織或者細胞樣本，通常選擇β-actin、β-tubulin、GAPDH、Lamin B、Histone H3、NaK、Atpase等。

l 植物來源實驗樣本，則可以選擇plant actin、Rubisco等。

l 根據來源樣本選擇不同的內參，是WB實驗成功的關鍵。也可參照文獻報導，選擇合適的蛋白作為內參。

（2）目的蛋白分子量

選擇內參抗體時，應該考慮目的蛋白分子量的大小。通常應該保證目的蛋白與內參蛋白分子量相差5 KD以上。比如目的蛋白分子量為45 KD，此時不適宜選擇β-actin（43 KD）作為內參，可以考慮選擇GAPDH或者β-tubulin作為內參。