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基因敲除與基因敲除小鼠

基因敲除與基因敲除小鼠


knockout & knockout mouse
基因敲除,是建立在基因同源重組技術以及胚胎干細胞技術基礎上的一種新分子生物學技術。
服務類別:轉基因總訪問:2169
最后更新:2014-2-18半年訪問:69
參考報價:具體請聯系 010-56315318
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  • 公司簡介

 

基因敲除與基因敲除小鼠
 
所謂“基因敲除小鼠、基因敲除模式小鼠“,就是先在小鼠的胚胎干細胞上通過基因重組的辦法進行基因修飾——將胚胎干細胞中的靶向基因改掉,然后將“修飾”后的胚胎干細胞植入小鼠的早期胚胎,生成嵌合體小鼠-基因敲除小鼠,基因敲除模式小鼠。這種嵌合體小鼠——基因敲除小鼠,基因敲除模式小鼠長大后,體內同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。當小鼠的生殖細胞恰巧被“修飾”過了,則它們就會生出基因完全被“修飾”過的基因敲除小鼠,基因敲除模式小鼠。

服務流程

A. 打靶載體構建:(1-2個月)

包括:基因結構分析、篩選策略設計、探針設計/構建和證實、打靶載體構建(體內重組工程)、核實(同源臂、Neo原件盒、報告基因)、制備電轉用DNASouthern雜交探針設計和優化。

B. ES細胞培養和電轉(2-3周)

   包括ES細胞的培養和將打靶載體電轉進ES細胞。

C. 陽性克隆的分離和篩選(3-5周)

包括通過PCRsouthern雜交對抗生素抗性ES細胞和陽性ES細胞的篩選。

D. 陽性ES細胞擴大培養和顯微注射(2-3個月)

   包括將陽性ES細胞顯微注射/轉移到囊胚中,將囊胚植入代孕母鼠,以及嵌合體小鼠的出生

E.  繁殖嵌合體小鼠并得到F1代小鼠,通過基因型檢測確認得到雜合子(2-3 月)

F. 運輸所有課題相關材料,包括一籠(不少于2只)F1雜合子小鼠和所有陽性重組胚胎干細胞(1-2月)。

需要您提供的信息

您只需告訴我們基因名字和您的特殊要求。如果您沒有相關的經驗,我們會免費為您提供咨詢,根據您的需求為您提供最佳的設計方案。

我們給您的終產品

不少于兩只的F1雜合子小鼠以及相關實驗數據。我們會提供給您相關的檢測方法和最終檢測報告,您也可以自己進行核實檢測,也可以在我們的幫助之下完成。

服務說明

在您的課題進行過程中,我們會每兩個周為您發送一次課題進展匯報,內容包括課題進展的每一步結果(包括電泳圖、PCR結果、酶切結果和雜交結果等),讓您清楚的了解自己課題的進展情況,就如同自己的學生在做lab meeting 一樣。

 

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