細胞轉移

服務流程

服務說明

 
細胞運動性的研究，尤其是在腫瘤細胞的侵襲轉移中應用很廣泛。腫瘤轉移是惡性腫瘤生物學特征之一，在腫瘤轉移過程中的某些階段，腫瘤細胞表現出較強的運動能力，如腫瘤細胞從原發瘤灶分離，進而侵入到鄰近組織及再穿過血管壁進入血液循環和穿出血管壁進入繼發部位等，因而細胞運動性的研究在弄清腫瘤細胞侵襲和轉移的機制上有重要位置。 
 

腫瘤運動性的研究方法主要是體外檢測腫瘤細胞主動移行的能力，一般有劃痕實驗、誘導轉移（transwell）實驗等。 

 

細胞劃痕

是測定了腫瘤細胞的運動特性的方法之一，借鑒體外細胞致傷愈合實驗模型，在體外培養的單層細胞上，劃痕致傷，然后通過藥物或者干擾手段觀察腫瘤細胞遷移的能力。  
 

吉凱實驗實例： 
針對目的基因的shRNA靶點病毒或對照病毒感染HepG2細胞，四天后，在96孔板中鋪細胞50000細胞，次日待細胞貼壁后用槍頭均勻劃傷，用PBS洗盡劃痕時殘余細胞，以無血清培養基培養，檢測細胞不同時間的劃痕愈合情況，從而篩選出運動細胞發生變化的實驗組。
  
對照組：感染陰性對照慢病毒細胞；
處理組：感染針對目的基因的shRNA慢病毒細胞
結論：降低目的基因的表達后，細胞運動能力減弱。 
 

誘導轉移 
將Transwell小室放入培養板中，小室內稱上室，培養板內稱下室，上室內盛裝上層培養液，下室內盛裝下層培養液，上下層培養液以聚碳酸酯膜相隔。我們將細胞種在上室內，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養液中的成分可以影響到上室內的細胞，從而可以研究下層培養液中的成分對細胞生長、運動等的影響。常用普通transwell小室（遷移實驗）和鋪有基質的transwell小室（侵襲實驗）兩種方式。
遷移實驗通常選擇帶有8.0µm微孔的聚碳酸酯膜小室，上室鋪細胞，下室加入FBS或某些特定的趨化因子，細胞會向營養成分高的下室跑，定量進入下室的細胞可反映細胞的遷移能力。侵襲實驗與遷移實驗不同的是，在聚碳酸酯膜上室側鋪上一層基質膠，用以模仿體內細胞外基質，細胞欲進入下室，先要分泌基質金屬蛋白酶（MMPs）將基質膠降解，方可通過，定量進入下室的細胞可反映腫瘤細胞的侵襲能力。 
 

吉凱應用實例： 
1、遷移實驗： 
 
 

不同的方式處理乳腺癌細胞MCF7后，細胞的運動能力發生改變。
 

2 、侵襲實驗  
 
對照組：感染陰性對照慢病毒細胞；處理組：感染目的基因shRNA靶點慢病毒細胞
結論：RNA干擾后細胞運動能力減弱。
 

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