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qPCR細(xì)胞內(nèi)源表達檢測預(yù)實驗
qPCR基因表達檢測預(yù)實驗用于檢測目的細(xì)胞中目的基因mRNA水平的表達豐度,以確認(rèn)RNA干擾正式實驗的可行性和實驗參數(shù)。
服務(wù)類別:分子與細(xì)胞總訪問:1289
最后更新:2020-11-6半年訪問:20
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qPCR 細(xì)胞內(nèi)源表達檢測預(yù)實驗

 


qPCR 基因表達檢測預(yù)實驗用于檢測目的細(xì)胞中目的基因mRNA水平的表達豐度,以確認(rèn)RNA干擾正式實驗的可行性和實驗參數(shù),如果目的細(xì)胞中目的基因的表達豐度低甚至不表達,則該細(xì)胞不適用于后續(xù)RNAi的細(xì)胞學(xué)實驗。

服務(wù)優(yōu)勢

 

服務(wù)流程


 

服務(wù)說明


 

Real-time PCR 預(yù)實驗范例 
 收集生長狀態(tài)良好的目的細(xì)胞(A和B細(xì)胞),提取RNA并反轉(zhuǎn)錄得到cDNA,并以該cDNA為模板,用針對目的基因以及內(nèi)參基因設(shè)計合成的Real-time PCR引物進行擴增(采用Biorad IQ5 Real-time PCR儀,Sybr Green法完成實驗),以檢測細(xì)胞中目的基因mRNA水平的表達。
 檢測結(jié)果如下(A細(xì)胞為黑色曲線,B細(xì)胞為紅色曲線):

 
熔解曲線和電泳圖顯示引物擴增特異性良好。Ct值原始數(shù)據(jù)顯示A、B細(xì)胞actin表達豐度基本一致,B細(xì)胞目的基因表達豐度低,A細(xì)胞目的基因表達豐度相對更高,所以A細(xì)胞更適合作為靶細(xì)胞進行后續(xù)RNAi實驗。 
 

Ø   相關(guān)服務(wù)  
基因表達檢測( qPCR) 
 

相關(guān)產(chǎn)品: 
常用細(xì)胞株 
經(jīng)過實驗驗證的qPCR引物 
 

 


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