實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記物，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過擴(kuò)增曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。一般用于mRNA轉(zhuǎn)錄水平的定量研究、不同樣本或基因組中DNA拷貝數(shù)的測(cè)定、基因芯片結(jié)果驗(yàn)證、藥效分析等。

　　金開瑞采用SYBR熒光染料法及TaqMan探針法進(jìn)行熒光定量PCR檢測(cè)，從引物設(shè)計(jì)到檢測(cè)一次性完成，提供2種常用的內(nèi)參引物及免費(fèi)的專業(yè)數(shù)據(jù)分析，每個(gè)樣品設(shè)置至少三個(gè)平行對(duì)照，保證結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。

一、服務(wù)特色

金開瑞的優(yōu)勢(shì)

1、方便：金開瑞從引物設(shè)計(jì)到檢測(cè)一次性完成；

2、經(jīng)濟(jì)：提供2種常用內(nèi)參引物；

3、可靠： 嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，每個(gè)樣品至少三個(gè)平行對(duì)照，免費(fèi)專業(yè)數(shù)據(jù)分析，保證結(jié)果的準(zhǔn)確可靠；

應(yīng)用方向

1、mRNA轉(zhuǎn)錄水平的定量研究，如驗(yàn)證基因過表達(dá)或基因敲降效果；

2、不同樣本或基因組中，DNA拷貝數(shù)的測(cè)定；

3、基因芯片結(jié)果驗(yàn)證；

4、藥效分析。

二、服務(wù)說明

服務(wù)流程

接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)

客戶提供

樣品及盡可能詳細(xì)的背景信息（如物種信息，擴(kuò)增目的基因NCBI登錄號(hào)，相關(guān)文獻(xiàn)和樣品來源等。）。

樣品：組織應(yīng)不少于100mg；細(xì)胞106-107個(gè)細(xì)胞；細(xì)胞或組織裂解液總RNA濃度須大于1mg/ml，單個(gè)樣品不少于50μl；cDNA不少于30ug。

（組織需液氮速凍、細(xì)胞收獲后加入Trizol保存于-80度。樣品用干冰寄送。避免各類污染和反復(fù)凍融。）

最終交付

溶解曲線、Ct值及完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容包括所提取RNA濃度、質(zhì)量檢測(cè)圖及熒光定量PCR原始數(shù)據(jù)及分析結(jié)果；熒光定量PCR完整的實(shí)驗(yàn)步驟、使用儀器、軟件設(shè)置參數(shù)等。

三、服務(wù)周期及報(bào)價(jià)

服務(wù)周期：

10-15工作日。

服務(wù)報(bào)價(jià)：

RNA提取 80元/樣品；

探針法 700元/基因（含引物探針設(shè)計(jì)合成）；

染料法 200元/基因；

內(nèi)參基因校正免費(fèi)、三重復(fù)管；

實(shí)驗(yàn)樣品 120元/樣品（＜10個(gè)）、110元/樣品（10-20個(gè)）、100元/樣品（＞20個(gè)）。

四、案例展示

            基因擴(kuò)增曲線

         基因擴(kuò)增溶解曲線圖

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