液閃測量技術是指將放射源置于某種閃爍液中，通過閃爍劑將放射能轉變為光能，再利用對光特別敏感的光電倍增管將之轉變為電脈沖，從而分析射線的能量和數量的測量方法。該方法目前已廣泛用于物質的吸收、分布、排泄、代謝、放免分析、受體的確定、生物大分子物質結構和功能的關系、基因工程等方面。隨著液閃技術的發展，計數器的更新換代，數據處理的自動化程度的提高，新的液閃劑的使用，溶劑、閃爍劑的選擇已不再是影響液閃測量的主要因素，而測量方式的選擇及樣品制備則成為造成誤差的主要因素。本文旨在闡明液閃測量技術的測量方式及其影響因素。液閃測量可分為勻相測量和非勻相測量兩種方式，其中非勻相測量包括乳狀、懸浮顆粒、固相測量法。

 

勻相測量是指樣品在閃爍液中以真溶液形式存在的測量方式。

脂溶性物質可直接溶于閃爍液，甚至用配好的閃爍液提取形成真溶液而進行測量，此測量方式效率高，費用低，但樣品容量小。水溶性樣品有兩種情況：一種是若樣品含量不多，可用水溶性或脂溶性溶液提取，溶解后直接加入閃爍液測量，閃爍液的配方視樣品水溶液的體積大小進行選擇。水溶性樣品的另一種情況是含固體量多或較難溶解，直接加入閃爍液可導致分相或沉淀。雖有些雜質形成的沉淀基本上不影響探測效率，但多數情況分相或沉淀會使探測效率降低，重演性變差。若仍欲用勻相測量法，可采取一些措施，改變樣品的化學結構，如加入一些特殊的溶劑等，例如二甲砜一乙醇一甲苯(1：4：5)配制的閃爍液可溶解許多化學結構不同的物質，包括多肽類激素、糖類及許多藥物，并可容納相當多的血漿。

 

勻相測量注意以下幾個問題：①如果樣品有雜質色素，最好不用一般吸附法脫色，因為有些實驗中放射性樣品的量很少，例如示蹤實驗，樣品有可能被吸附而導致嚴重誤差，為了避免上述誤差，比較常用的有H，O'或過氧化苯甲酰脫色法，但應用這些脫色法，有時會導致化學發光，影響測量結果，應予注意。②示蹤實驗因其前身物的比放射性可能高出產物好多倍．必須注意清除前身物才能得到可靠數據。③尤其要注意樣品在杯壁的吸附。不同的化學物質吸附程度不同，不同樣品杯吸附也不同。操作者常常會發現隔日測量計數率逐漸降低，越是能量低的同位素越明顯，這是因為樣品吸附在杯壁上或樣品分子間的凝聚所造成。④外道比法不受吸附影響，樣品道比法因吸附而降低，可用外道比法檢出有無樣品自吸附。減少吸附的方法有：用硅膠處理玻璃杯壁；改用對樣品吸附小的杯子；用硅膠使樣品穩定在閃爍液中；以及加入載體等。

 

非勻相測量法是指樣品以乳狀液、懸浮顆粒存在于閃爍液中或吸附于固體支持物上的測量方式。

2．1乳狀測量法：乳狀測量法主要針對勻相測量水溶性樣品中存在的問題而提出的(容納樣品少，效率低等問題)。最常用的是某些聚乙氧基非離子表面活性劑tritonx，100及其類似物，其理化特性是常溫下無色無味的粘稠液，苯環左側為疏水基團，右側聚乙二醇為親水基團，故有乳化作用，如在tritonx一100中加人水和烷基苯時可以任何比例混合，此混和物的物理狀態隨三者的比例而變化，溫度變化也可使一種狀態轉化為另一種狀態，制樣及測量時最好保持恒溫。乳狀測量一般用于水溶性樣品，此時放射源在水相，閃爍劑在有機相，從而帶來測量上的一些特點：

 

首先是樣品的自吸收問題，這種自吸收只對氚這樣的低能源才有影響。通常可以看到，乳白液中H一甲苯的計數高于H2O，清液和半透明液無此差別，說明顆粒大小對效率有明顯影響，因此對H的測量必須注意保持一定的顆粒狀態亦即保持水一甲苯一triton三者的比例恒定，而且最好不用乳白液，否則重演性變差，進一步研究表明，選擇以上三者的比例很重要，有的比例探測效率雖高，但稍有變化即明顯影響效率。

第二個特點是樣品的容量大，濃度可達30％～40％，而且水溶液含有相當量的鹽和堿時，探測效率仍很高。此外不同的物質有不同的最佳比例，血漿和尿液可直接加人甲苯一tritonX．100中測量，甲苯和tritonX一100的比例為1：1時，10ml可加血漿2ml或尿lml。

第三個特點是淬滅特點，水相中淬滅劑與閃爍劑接觸機會少，故化學淬滅程度比勻相時小得多。淬滅程度與閃爍劑濃度成正相關，主要以烷基苯的濃度計算。閃爍劑的最佳濃度可通過實驗選擇，一般不需很高濃度。應注意的是tritonX．100有時可導致化學發光，特別是堿性水溶液更加嚴重，據報導用離子交換樹脂法除去堿性水溶液中的雜質或采用低溫法都可使化學發光減少，除tritonX一100外，還有一些產品可用作乳化劑，例如SteroxDJ、Igepal、CA720、Instagel、Aquasol等，其中有些較tritonx一100的探測效率要高。

 

2．2懸浮顆粒法：本法借助凝膠劑的作用使放射性固體顆粒在閃爍液中呈穩定的懸浮狀態可使用的凝膠有：硬脂酸鋁、Thixin、細顆粒硅膠或一種支鏈烷基伯胺與二甲苯異氰酸脂形成的脲衍生物。該方法的不足之處主要是多數醫用樣品作成直徑一致的固體顆粒不太容易，而且對氚來說自吸收嚴重，故懸浮顆粒法目前已很少應用。

2．3固相法：固相測量法主要用于測量不溶于閃爍液的固體樣品，樣品分子吸附于某種支持物上，而后直接投人烷基苯閃爍液中，使閃爍液充分與放射分子接觸，產生閃爍光。本法制樣簡單，費用低，樣品易保存及運輸方便，近年來發展很快。最初使用的是濾紙和拭鏡紙，烤干后投人到閃爍液中測量。C或33S等樣品的檢測結果表明：探測效率相當滿意，一般不比勻相測量的差；紙片可以疊加測量，疊加測量的Cpm等于各自的Cpm總和；紙片取出后不殘留任何放射性，閃爍液可重復使用；閃爍液只需3～5ml即可達最大探測率，體積甚至減少到幾滴，探測效率降低也不嚴重；由于沒有淬滅劑進人閃爍液中，閃爍液可按無淬滅的脂溶性選擇：固體樣品的厚度對探測效率沒有影響。

近年來紙片逐漸為其它材料所代替。玻璃纖維吸水性好，水溶性樣品滴加其上之后不滲人纖維的內部，烤干后仍保留在其表面上，故探測效率明顯高于濾紙，并接近水溶性樣品的勻相測量，而紙片法的其它優點仍保留，此外玻璃纖維紙耐酸，故細胞可過濾到濾紙上再用TAC處理，烤干后直接測量，這樣既有利于減少樣品的處理誤差，又使操作簡化。另一新材料為纖維脂薄膜，也廣泛用于固相測量，其特點是對核酸及大分子特物質具有吸附作用，主要用于大分子物質的測量。

（河北醫科大學學報  趙京山 齊錦生 ）