15女上课自慰被男同桌看到了,亚洲国产精品久久久久久久,大雞巴亂倫有声小说,国产精品成人一区二区三区

English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術文章 > 原代細胞核基質的制備

原代細胞核基質的制備

瀏覽次數:2336 發布日期:2011-1-27  來源:www.pricells.com.cn
                              原代細胞核基質的制備                                        

試劑和器材: 
1. 硫酸銨(含10mmol/L Tris-HCl,(pH7.4)及0.2mmol/L MgCl2的1mol/L與0.2mol/L硫酸銨溶液);
2. 氯化鎂(1mol/L儲存液);
3. 苯甲基磺酰氟(PMSF)(無水乙醇配制的1mol/L儲存液);
4. 純化的細胞核保存于含0.25mol/L蔗糖、10mmol/L Tris-HCl,(pH7.4)、5mmol/L MgCl2的溶液中;
5. DNA酶Ⅰ;
6. Tris-HCl(1mol/L儲存液,pH7.4);
7. 懸浮緩沖液(SB):5mmol/L MgCl2、10mmol/L Tris-HCl,pH7.4(含0.1mmol/L苯甲基磺酰氟);
8. Triton X-100;
9. 低速離心機,配有固定角轉子和離心管;

實驗方法:
   所有的試劑置于0—4℃,并且所有操作均在0—4℃完成。
1. 向核懸液中加入Triton X-100使其濃度達到1%(體積分數),孵育30min同時用移液器小心混勻,以免產生氣泡;
2. 1000g離心10min,棄去上清。用懸浮緩沖液小體積重懸提取的核沉淀(如5ml);
3. 用DNA酶Ⅰ(30U/mg DNA)消化細胞核30min;
4. 通過緩慢添加1mol/L硫酸銨溶液來增加鹽濃度,使其最終離子強度達到0.6(0.2mol/L 硫酸銨),加入0.2mol/L硫酸銨使體積達到40ml,然后孵育30min;
5. 1000g離心15min沉淀核基質,棄去上清;
6. 用懸浮緩沖液重懸沉淀,用相差顯微鏡或薄片電鏡檢測獲得的產物;

發布者:武漢原生原代生物醫藥科技有限公司
聯系電話:027-87490190
E-mail:service@pricells.com.cn

標簽: 原代細胞
用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 祁阳县| 湘乡市| 全椒县| 株洲县| 宝坻区| 瑞丽市| 靖安县| 广东省| 丹寨县| 乐都县| 无极县| 阳泉市| 铜山县| 桐庐县| 阿鲁科尔沁旗| 缙云县| 诸城市| 西林县| 阳新县| 永安市| 丰都县| 富民县| 赣榆县| 太仆寺旗| 武穴市| 西城区| 连南| 什邡市| 安国市| 永平县| 永丰县| 铁力市| 榆林市| 永城市| 通许县| 扶沟县| 嘉鱼县| 武宣县| 阳城县| 浠水县| 土默特左旗|