如何選擇合適的western Blot成像方法

最合適的Western blot實(shí)驗(yàn)方法取決于您期望獲得哪些信息，以下內(nèi)容將幫助您選擇最佳實(shí)驗(yàn)方法。

化學(xué)發(fā)光方法

化學(xué)發(fā)光western blot是相對(duì)容易且靈敏度極高的檢測(cè)方法，靈敏度可以達(dá)到fg級(jí)。

分子量差異顯著的蛋白，通過(guò)電泳可輕松分離，使用“化學(xué)發(fā)光”檢測(cè)非常方便。

蛋白凝膠電泳:                      

檢測(cè)單一蛋白

確定蛋白有無(wú)

檢測(cè)抗體反應(yīng)

蛋白純度分析

檢測(cè)低豐度蛋白

化學(xué)發(fā)光，單信號(hào)，單蛋白

熒光方法

熒光Western blot使用熒光染料標(biāo)記的二抗進(jìn)行檢測(cè)，印跡膜上的靶標(biāo)蛋白濃度與熒光信號(hào)強(qiáng)度呈線性關(guān)系，實(shí)現(xiàn)真實(shí)可靠的定量分析。熒光染料發(fā)射光譜不同，因此在一張 印跡膜上可實(shí)現(xiàn)多重檢測(cè)。在無(wú)需剝離和二次孵育條件下，進(jìn)行上樣量質(zhì)控，分析翻譯后修飾蛋白時(shí)尤為適用。

熒光western blot使用 紅外或者可見(jiàn)熒光染料.

可見(jiàn)熒光檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)

當(dāng)需要同時(shí)檢測(cè)三個(gè)蛋白時(shí)，可見(jiàn)熒光顯然是最佳的選擇。可見(jiàn)熒光具備很好的靈活性，有多種可見(jiàn)熒光染料可供選擇。如果您正在使用可見(jiàn)熒光染料（發(fā)射光譜可被區(qū)分）進(jìn)行 其它實(shí)驗(yàn)，很容易將這些染料應(yīng)用于Western blot實(shí)驗(yàn)中。

熒光檢測(cè)方法，可用于:                          

同時(shí)檢測(cè)多種蛋白

研究翻譯后修飾蛋白

同一印跡膜的上樣量質(zhì)控

多個(gè)泳道歸一化

精確定量 Western實(shí)驗(yàn)

多重?zé)晒猓�多種蛋白

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