針對(duì)膀胱癌的研究少不了細(xì)胞和動(dòng)物模型的加持。怎么選擇這些工具能夠幫助我們更好的進(jìn)行研究,獲得陽(yáng)性數(shù)據(jù),發(fā)表論文,申請(qǐng)基金,登上人生巔峰,你有了解嗎?今天就給大家聊一聊膀胱癌研究中,體內(nèi)外模型的選擇,以及病毒工具的應(yīng)用。且聽(tīng)在下慢慢道來(lái)。
一、我需要哪種細(xì)胞模型?是否易于操作?
俗話說(shuō),實(shí)驗(yàn)要想做好,細(xì)胞必不可少。細(xì)胞模型有三個(gè)優(yōu)點(diǎn):周期短,背景干凈,易出結(jié)果,所以一般都作為所有研究的第一步。膀胱癌中,移行細(xì)胞癌約占患者總數(shù)的90%以上,因此也是基礎(chǔ)研究的重點(diǎn)。下面總結(jié)了一些常用膀胱癌細(xì)胞的特性:
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二、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)效果不錯(cuò),那動(dòng)物實(shí)驗(yàn)怎么做?
做完體外的細(xì)胞實(shí)驗(yàn),要想發(fā)高分文章,必須要有體內(nèi)部分的數(shù)據(jù)來(lái)證明。膀胱癌研究中,最常用的動(dòng)物模型當(dāng)屬皮下移植瘤模型,該模型操作簡(jiǎn)單、成瘤率較高,已廣泛應(yīng)用于腫瘤基礎(chǔ)性研究和抗腫瘤藥物研發(fā)中。另外,原位模型因?yàn)槠湓诎螂咨现苯映闪觯軌蜉^好地再現(xiàn)人膀胱癌疾病,也在臨床研究上發(fā)揮日益重要的作用。
原位膀胱癌模型的建立方法有兩種:誘導(dǎo)法、腫瘤細(xì)胞移植法。誘導(dǎo)法由于時(shí)間跨度過(guò)大,限制了其發(fā)展應(yīng)用,目前實(shí)驗(yàn)中多采用腫瘤細(xì)胞移植法。今天給大家介紹的是通過(guò)手術(shù)方法將癌細(xì)胞直接注入小鼠膀胱建立原位移植瘤動(dòng)物模型,如以下文獻(xiàn):
三、體內(nèi)外模型選好了,那么我的實(shí)驗(yàn)需要使用哪種方法對(duì)基因進(jìn)行操作呢?
由于細(xì)胞和動(dòng)物模型的不同特點(diǎn),常常導(dǎo)致基因操作的難易程度不一樣。慢病毒是一種非常高效的基因操作工具,不僅在細(xì)胞系中具有高效的表現(xiàn),在做體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,也會(huì)經(jīng)常使用,比如原位組織注射研究基因的功能。下面我們就來(lái)看一看,如何選擇合適的慢病毒載體對(duì)基因進(jìn)行操作吧~
啟動(dòng)子、熒光標(biāo)記、抗性標(biāo)簽是我們選擇載體需要考慮的三大要素。實(shí)驗(yàn)不同,這些元件也需要相應(yīng)變化。對(duì)于膀胱癌研究來(lái)說(shuō),UPII是較為常用的組織特異性啟動(dòng)子。按例祭出神圖一張,定制你的專(zhuān)屬載體,就是這么簡(jiǎn)單!
上海吉?jiǎng)P基因化學(xué)技術(shù)有限公司成立于2002年,擁有BSL-2級(jí)別的慢病毒包裝實(shí)驗(yàn)室。病毒生產(chǎn)線通過(guò)ISO9001質(zhì)量管理體系驗(yàn)證,月均定制基因病毒產(chǎn)品包裝超過(guò)1000次。慢病毒生產(chǎn)采用6項(xiàng)QC檢測(cè)、病毒純度分級(jí)純化以及病毒滴度絕對(duì)定量檢測(cè)確保病毒質(zhì)量。
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參 考 文 獻(xiàn)
【1】Zhi Yuwang et al. “Evaluation of thymosin4 in the regulation of epithelial-mesenchymal transformation in urothelial carcinoma." Urologic Oncology 30 (2012): 167-176.
【2】Wang, Jia-bin, et al. “Long non-coding RNA LOC572558 inhibits bladder cancer cell proliferation and tumor growth by regulating the AKT–MDM2–p53signaling axis.” Cancer Letters 380 (2016): 369-374.
【3】Zhao Fengjin et al. “Knockdown of a novel lincRNA AATBC suppresses proliferation and induces apoptosis in bladder cancer.” Oncotarget 6.2 (2014): 1064-1078.
【4】Zhang, Qi, et al. "MiR-193a-5p Targets the Coding Region of AP-2α mRNA and Induces Cisplatin Resistance in Bladder Cancers." Journal of Cancer 7 (2016): 1740-1746.
【5】Heng Li et al. “Cisplatin-induced epigenetic activation of miR-34a sensitizes bladder cancer cells to chemotherapy.” Molecular Cancer. 13.8 (2014): 1-11.
【6】 Uchino, Keita, et al. "Therapeutic effects of microRNA-582-5p and-3p on the inhibition of bladder cancer progression." Molecular Therapy 21.3 (2013): 610-619.
之前幾期給大家分享了幾種大癌種的體內(nèi)外模型和工具總結(jié),想再看看的,請(qǐng)戳下面:
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