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C280成像系統在EtBr、SYBR Green、考馬斯藍和銀染蛋白膠成像中的應用

瀏覽次數:4939 發布日期:2017-12-25  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

Azure Biosystems c系列數字成像系列產品是行業領先產品,用戶界面友好、應用靈活。 在本應用中,我們展示了一些可以在c系列家族最新成員Azure Biosystems c280上完成的新應用。

簡介

Azure Biosystems c280數字成像儀是數字化學發光成像的理想切入點。 然而,其優點并不止于此,具有雙波長302nm和365nm紫外的c280用于溴化乙錠(EtBr)DNA凝膠的成像;使用EPI藍光LED 用于“安全”DNA染料SYBR Green等的成像;RGB混合白光光源用于考馬斯藍,銀染蛋白膠等的成像。

C280的用戶界面友好,自動聚焦,軟件控制光源和濾光片選擇使成像變得更容易。

材料和方法

DNA凝膠

通過凝膠電泳分離進行系列稀釋的東升生物技術公司100bp Ladder Plus。使用預先EtBr染色的凝膠或用SYBR Green后染色的凝膠,使用紫外透射儀(302nm)或EPI藍光在Azure Biosystems c280數字成像儀上采集圖像。

考馬斯亮藍染色的凝膠

一系列純化的轉鐵蛋白進行稀釋,使用4-15%的Tris-Glycine凝膠進行稀釋,考馬斯亮藍染料進行染色,使用AzureC280 RGB混合光源進行成像采集成像。

化學發光+可見彩色Marker成像

純化的轉鐵蛋白經過一系列的稀釋從500pg-61fg,使用SDS-PAGE電泳進行分離,蛋白分離后使用Azure轉印buffer轉印到低熒光背景膜上,進行封閉,孵育 chicken-anti-transferrin 的一抗,漂洗,孵育goat-anti-chicken HRP 的二抗;所有的稀釋液使用Azure Chemi Blot Blocking

Buffer.使用Azure Radiance chemiluminescent 底物液,成像使用C280化學發光模塊進行采集并與彩色marker進行整合。

結果和討論

在這個應用中,Azure Biosystems c280數字成像儀應用更靈活。 DNA凝膠結果顯示在圖1中 - A)EB使用紫外302nm成像,B)SYBR Green染色的類似凝膠用Epi Blue成像。

圖1.DNA凝膠使用EB和SYBR染料進行染色A)EB染色的凝膠使用UV302nm進行成像 B)SYBR Green染色的DNA凝膠,使用RGB混合白光光源進行成像,圖中方框展示的是78pg的濃度

圖2顯示了代表性考馬斯藍染色的蛋白質凝膠。 Azure Biosystems c280數字成像儀具有高分辨率CCD,自動圖像采集協議。 可見成像模式直接獲取彩色圖像,對比更明顯。

圖2:考馬斯亮藍染色的凝膠,純化的轉鐵蛋白經過一系列的稀釋從5000ng-5ng,使用4-15%的Tris-Gly凝膠進行分離,使用考馬斯亮藍染液進行染色,方框展示的是10ng的蛋白。

最后,圖3顯示了數字化學發光圖像與可見光彩色marker整合圖,允許精確的分子量分析。

圖3.化學發光-可見光整合成像,純化的轉鐵蛋白經過500pg-61pg一系列稀釋,使用化學發光 western blot進行檢測,C280化學發光和可見彩色Marker同時成像進行整合。

言之,Azure Biosystems公司的c280是多功能多應用成像儀,可以簡化大量常用的實驗室技術。 以其經濟的價格,和易用性,C280化學發光成像系統是您實驗室理想選擇。

發布者:艾普拜生物科技(蘇州)有限公司
聯系電話:0512--86860010
E-mail:info@aperbio.com

標簽: Azure 成像系統
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