我們在實驗過程中，使用拉制儀時難免會遇到各種疑問：

水平拉制儀和垂直拉制儀有什么不同？哪個更好用呢？
玻璃微電極的阻抗如何保持穩定？
使用到什么程度需要更換加熱片？……

別擔心，本期九大常見問題解答，讓你的困擾輕松解決！

Q1：拉制儀的拉制原理是什么？
依據加熱源而分，常見加熱源為鉑銥合金加熱片，較少為二氧化碳激光。固定玻璃管后，通過對鉑銥合金加熱片接通恒定電流產生高溫從而融化插入合金片中的毛細玻璃管；通過重力作用或者施加額外拉力將中間融化的毛細玻璃管向兩側分步拉斷成尖端對稱的兩個玻璃微電極；通過調節拉制參數（熱量、拉力、速度、定時/延時），拉制出不同尖端形狀的玻璃微電極。

Q2：可以在哪些實驗場景中用到拉制儀？
場景一為電生理相關的刺激和記錄微電極的制備，主要是檢測離子通道微弱生物電信號的膜片鉗實驗；場景二為顯微注射實驗所用注射針的制備，包括細胞核注射、斑馬魚注射、線蟲注射、胞漿內精子注射、病毒腦立體定位注射等；場景三為細胞選擇、采集、轉移及吸取所用微電極的制備；場景四為微流控芯片技術中液流管路及液流控制系統制備；場景五為新型印刷電路及3D打印技術中噴頭的制備等。

Q3：水平拉制儀和垂直拉制儀有什么區別？
垂直拉制儀，使用加熱絲并接通電流對玻璃管中部加熱并達到熔點，依靠重力的作用拉斷玻璃管。操作簡單，但拉制顯微注射用電極較為困難。

水平拉制儀，通常采用微控制器控制其拉制過程，將玻璃管兩端水平固定，加熱其中部，利用電動力或彈力作單次或多次拉制，玻璃管兩端同時受力從而拉斷。可通過調節拉制參數（熱量、拉力、速度、定時/延時），拉制出滿足更多不同需求的玻璃微電極。總體來說，水平拉制儀優于垂直拉制儀，控制比較精確，拉出的電極參數比較穩定，而且電極尖端口徑及錐體形狀變化較小。

Q4：提供的注射類拉制模板沒有滿足需求，如何調試參數獲得目標微電極？
主要方法是在使用拉制模板的基礎上對單個參數或多個參數進行調整。一般拉制儀提供多個實驗場景的拉制模板，涵蓋了膜片鉗實驗及各類顯微注射實驗。

變長調試：優先增加速度、其次是熱量。注意觀察電極形態，當達到某一值后，電極形態不再發生變化，此時可同時增加速度和熱量。

變長變硬：①先調整長度，然后修剪；②同時改成定時模式，設置為1，拉力最好為0。

變短調試：優先降低速度、其次是熱量。注意觀察電極形態，當達到某一值后，電極形態不再發生變化，此時可同時降低速度和熱量。

Q5：玻璃微電極的阻抗如何保持穩定？
①儀器檢測：開機預熱十分鐘左右，檢查加熱片、玻璃管及噴氣孔的相對位置是否保持正確，測試軟化點后開啟夾鉗預熱模式。

②參數調試：首先膜片鉗微電極拉制一般是4步或5步循環；其次速度中值的調試能確保循環次數的穩定，從而保證阻抗的穩定。具體來說，以推薦參數為基礎，增加或減少速度，以得到不同的循環次數，找到循環4次和5次的速度區間，并得到對應的速度中值，測試循環4次和循環5次的速度中值對應的阻抗，并與目標阻抗比較，選擇阻抗更接近目標阻抗的速度中值進行調試。
 

Q6：不同型號的加熱片應該如何選擇呢？
以瑞沃德MP-500水平拉制儀為例，顯微注射類實驗推薦使用2545B型號，該加熱片最寬，便于拉出較長的尖端；顯微注射實驗與膜片鉗實驗（＞5MΩ）推薦使用3030B型號；膜片鉗實驗（1-10MΩ）推薦使用3025B型號，該加熱片最窄，便于拉出較短較硬的尖端。

Q7：使用到什么程度需要更換加熱片？
觀察到加熱片表面有明顯的變形，燒痕或劃痕等情況，可以考慮更換加熱片。根據使用頻繁程度，一般3-6個月亦可考慮更換。

Q8：什么時候需要測試軟化點呢？
軟化點的含義是能夠使加熱片產生足夠熱量從而軟化玻璃管的電流值。其中提及到兩個重要物件，加熱片及玻璃管。因此當使用的加熱片或者玻璃管的型號發生改變時均需要重新測試對應的軟化點。一般測試3次，取最大值即可。

Q9：干燥劑什么狀態下需要更換呢？
干燥劑干燥狀態下為藍色或者藍紫色，吸潮后變成粉紅色。當干燥劑大部分為粉紅色時（一般2/3時），更換干燥劑。干燥劑較多使用無水硫酸鈣。

*下期內容為拉制儀常見耗材選購小貼士，持續關注呦