移液器的工作原理及保持移液器準確度的方法
移液器的準確度和精確度
移液器的準確度和精確度是挑選移液器時重要指標。準確指移液量與設置量相等。精確是指多次移液結果接近一致。一般移液器會存在以下幾種情況：
■ 結果準確但不精確：雖然平均移液量與設置量相符，但是單次移液結果之間互有偏差。
■ 結果精確但不準確：移液結果之間只有微小差異，但是平均移液量與設置量相差甚遠。
■ 結果準確且精確：平均移液量與設置量相等，移液結果之間只有微小差異。
準確度和精確度這兩個術語在移液器技術參數(shù)中表現(xiàn)為系統(tǒng)誤差 %（不準確度 %）和隨機誤差 %（不精確度 %）。值得注意的是，通常只有當匹配原廠吸頭使用時技術參數(shù)才會有效。使用具有高品質、經(jīng)專業(yè)維護和校準的移液器，以及合適的高品質吸頭才能取得最好的準確度。另一方面，移液經(jīng)驗和實驗室管理規(guī)范對精確度有很大的影響，比如正確的移液角度、最佳移液速度以及一致的移液節(jié)奏等因素。
為了取得高水平的準確度，應選擇能夠操作所涉及容量中最小容量的移液器。這一點很重要，因為排液容量接近移液器最小容量時，移液器的準確度會降低。例如，分配 10μl 的液體時，使用 1 ml 容量的移液器會產生相當差的準確度，而使用 300 μl 的移液器效果則會好一些，使用 10μl 的移液器則會產生理想的效果。
為了取得良好的移液結果，務必選擇具有較小移液力、吸頭安裝力、吸頭彈出力的移液器。移液力大的移液器會加速手臂和手部肌肉的疲勞，尤其是在長期移液工作期間，從而導致更為不理想的結果。所以購買移液器時您可以按照以下特點進行選擇，這些都會影響到移液結果的可靠性：
■ 針對各種液體都可以輕松校準。如果設定可以保存待用也是有益的。
■ 容量調節(jié)鎖定：這個功能可以防止移液時出現(xiàn)意外的容量改變。應特別留意該機制的可靠性、人體工學設計以及靈敏性。
■ 移液器或移液器帽的顏色標識：這可以幫助您選取正確的移液吸頭。
移液器屬于精密儀器，所以做好移液器的維護，解它們的工作原理，熟練掌握移液器的使用技術，才能保證移液器準確度。
移液器的工作原理
1. 空氣置換型移液器
空氣置換移液器的工作原理有點像注射器，不同之處在于活塞和樣品之間有一個充氣墊。氣墊可防止活塞與溶液接觸。將溶液和移液管分開是好的，但它也對移液器施加了一些限制。
溫度和壓力會影響氣墊的體積，從而影響移液精度。此外，揮發(fā)性溶劑會蒸發(fā)到氣墊中，從而導致分配體積不準確且低于移液器上顯示的體積。
空氣置換移液器的內管也容易受到移液溶液的污染。所以，盡量不要吸取腐蝕性液體。
2. 非空氣置型換移液器
非空氣置型換移液器也被成為容積式移液器。容積式移液器的工作原理也類似于注射器的工作，但它們沒有氣墊。這使得它們在移取揮發(fā)性溶劑時更準確，因為沒有地方（氣墊）讓溶劑蒸發(fā)。這也降低了移取腐蝕性物質和生物危險材料時受到污染的機會，這使得容積式移液器更適合處理這些試劑。這種移液器一般造價昂貴，因為移液器和吸頭是一個單元，移液時都需要更換。當然，還有一種辦法是使用外置活塞式移液器，這種移液器可用來吸取石油等黏稠液體及揮發(fā)、腐蝕性較強的液體。比如瑞寧的 Pos-D外置活塞式移液器。
保持移液器準確度的方法：
1. 定期進行移液器的維護和保養(yǎng)
從理論上講，移液器的維護保養(yǎng)頻率應維持在，每 6-12 個月/次。這只是一個粗略的指南；根據(jù)您對準確性的要求，您需要更頻繁地對其進行維修。這項工作，可以自行完成，也可以交給售后服務進行，據(jù)了解，Rainin系列移液器一般會為客戶提供定期免費維護、校準移液器等售后服務。正常的移液器維護校準包括移液器的初校準、清理、給易損部件加潤滑脂以及更換任何磨損的密封件或其他部件。
2. 每次實驗前做好移液器的點檢工作
檢查移液器的前端是否有任何明顯的損壞。如果出現(xiàn)問題，請及時報修，切勿帶故障工作。
3. 每天使用前需要清潔移液器
應該用一些 70% 的乙醇擦拭移液器。
4. 使用移液器支架垂直存放移液器
以這種方式存放移液器可防止移液器桶中的任何液體進入移液器內部并導致腐蝕。
5. 切勿將移液器放在吸頭有液體的一側
使用過程中只有空氣才能將液體與移液管分開。所以移液管內的任何液體都有可能導致污染，甚至會導致液體倒吸而造成嚴重的腐蝕損壞。
6. 保證吸頭的匹配度及正確安裝
在吸取和分配液體時，不匹配或安裝不當?shù)奈^會導致空氣逸出，從而導致結果不準確。
7. 需要保證正確使用移液器
關于移液器使用的有關基礎知識，請查看Rainin移液技術手冊。移液器的正確使用需要遵循以下原則：
①移液器動作緩慢、平穩(wěn)；
②吸取液體時垂直握住移液器；
③吸取液體時，只需將吸頭稍微浸入液體即可。否則，您會在吸頭上涂上液體，液體將隨移液器內的體積一起轉移；
④分配液體時，垂直握住移液器，但使接收容器的側壁保持 45 度角。移液器靠在側壁上或移入已經(jīng)存在的液體中。
8. 移液的準確度的預測
其實你移液器操作技術是可以檢測的.具體方法如下：通過將 100 µL 分配到精細天平上來檢查您的移液技術的準確性。您制作的液滴的質量應約為 0.1 克。現(xiàn)在重復做同樣的步驟 10 次并記錄你獲得的質量。如果變化超過 +/-0.5%，那么您要么需要重新評估您的移液技術，要么多加練習！
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