OT-2移液工作站搭載熱振蕩模塊,助力三種 ELISA 流程實現自動化
瀏覽次數:1416 發布日期:2024-2-2
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酶免疫分析(EIA)或酶聯免疫吸附測定(ELISA)是液體樣本中檢測目標分子(例如抗原)的常用分析工具,通常用于免疫診斷或研究。該測定一般采用 96 孔板格式,其工作流程通常包括試劑轉移和混合,以及一些在恒定溫度下的孵育和洗滌步驟。這些步驟均要求樣本處理具備高度一致性。為了實現自動化,有研究人員使用 OT-2 自動化移液工作站搭配熱振蕩模塊,開發和測試了三種 ELISA 全自動化方案,包括 Takara Bio 的人纖維連接蛋白(FN)夾心 EIA,Tecan 的唾液皮質醇競爭 ELISA,以及 Cell Sciences 的中和 SARS-CoV-2 抗體競爭 ELISA。
實驗簡介:
酶聯免疫吸附測定(ELISA)是一種通過高度特異的抗體-抗原的相互作用對液體樣本的目標分子(例如抗原)進行檢測和定量的技術。這種測定通常在 96 孔或 384 孔板上進行,其提供用于固定抗原的固體表面,一般通過將抗原直接連接到固體表面或通過使用預涂在固體表面上的捕獲抗體來實現。通過該過程,它能夠將抗原與樣本中其他非靶標分子分離開來。
ELISA 的常規操作步驟包括試劑轉移、孵育以及重復洗滌,這些步驟可以在 OT-2 上輕松實現自動化。在每個實驗步驟之間會進行連續的洗滌,以去除未結合的分子。為了防止剩余的試劑被帶到下一個實驗步驟中,把殘留的液體全部吸走顯得尤為重要。Opentrons 的 8 通道移液器可進行高效、精準的移液處理,以充分滿足 ELISA 中試劑轉移和洗滌的需求。此外,還可以通過添加 Opentrons 溫控模塊或熱振蕩模塊,以提升自動化水平和滿足實驗中樣本孵育環節所需的恒溫功能(例如設定 37℃ 以促進抗原-抗體相互作用)。
方案亮點:
1、配備 8 通道移液器和熱振蕩模塊的 OT-2 移液工作站,具備高精度自動化完成 ELISA 的能力。
2、在更高通量設置中,該方案可以在最短的動手時間內處理多達 96 個樣本。
部分方案圖片:
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通過使用 OT-2 進行三種 ELISA 檢測,作者得出結論:
1、在 OT-2 上進行的稀釋處理和吸光度測量顯示出高度一致的結果,證實了 OT-2 液體處理的精確性和可重復性。
2、根據廠家說明書的要求,該對照組的 OD450 值都在有效范圍內,驗證了實驗的有效性。
3、通過比較抑制率(確定樣本中是否存在中和抗體),成功檢測到先前被診斷為 SARS-CoV-2 抗體陽性的樣本中存在的中和抗體。
綜上所述,該實驗在檢測中和抗體方面表現出優越的精確性和可靠性,OT-2 的樣品處理能力足以與傳統手動操作方法相媲美。