MetaSPR技術在分子垂釣中的應用
在生命科學的探索中，每一次分子的精準“相遇”，不僅映射了生命內在的復雜旋律，還潛藏了解讀疾病、促進健康乃至革新治療手段的無限可能。想象一下，如果我們能夠設計出完美的“誘餌”，專門吸引并識別那些關鍵的靶標分子，那將開啟怎樣的科研奇跡？
精心策劃的分子“邂逅”
目前，Pull-Down技術作為分子垂釣的主流方法，卻因其操作復雜和非特異性高而受限。而一個理想的捕獲過程應該確保目標分子在固定狀態下的活性結合，最小化非特異吸附，實現高效的洗脫以降低損失，并能精確地鑒定分子間的相互作用。針對于此，MetaSPR技術創新性地通過檢測特定波長下透射光的光密度值變化，實時捕捉并記錄分子相互作用的動態過程，極大地提升分析速度與精確性，成為驅動領域前進的關鍵技術。
01 分子垂釣實驗技術路線
02 MetaSPR分子垂釣技術路線
03 分子垂釣實驗流程
藥物或蛋白表位垂釣與鑒定
TNF-α即腫瘤壞死因子α，是TNF超家族的配體。它是一種多效細胞分子并介導細菌感染的免疫應答，在多種免疫相關疾病中扮演著重要的角色。
近年來開發抗TNF-α的抗體藥物在關節炎、銀屑病、炎癥性腸病和其他一些炎癥性疾病中取得了不同程度的成功，使其成為目前市場價值較高的生物藥靶點之一，相關的原研生物藥近十年來的銷售總額持續增長。利用MetaSPR技術進行抗體藥物表位垂釣與鑒定對于加速藥物開發進程和深入研究抗體藥物的作用機制來說，是至關重要的。
抗體藥物表位垂釣與鑒定
- MetaSPR技術鑒定目標抗體與TNFa結合且親和力較高
- 將TNFa蛋白消化成多肽
- 氨基傳感器固定抗體，抓取多肽片段并洗脫進行質譜鑒定；鑒定出與靶標抗體結合的多肽片段為—SDKPVAHVVANP—
- 合成多肽序列并與抗體再次進行MetaSPR技術分析，確認多肽與抗體親和力為4.90E-10M
中藥小分子垂釣
TMBIM6是一種含有BAX抑制基序跨膜蛋白，在細胞凋亡、內質網應激反應以及線粒體穩態等方面有重要作用。研究表明TMBIM6通過組裝特定的蛋白質復合體，促進腫瘤細胞的存活和增殖，在多種癌癥類型中過表達。TMBIM6下調可抑制腫瘤細胞的侵襲和轉移能力。
中藥小分子垂釣與鑒定
- 將TMBIM6蛋白固定在MetaSPR芯片
- 流通千金子中藥粗提物并與TMBIM6蛋白進行結合、洗脫
- 將收集的洗脫液進行質譜分析鑒定，初步鎖定候選化合物13-OD
- 分離或合成13-OD并與TMBIM6蛋白進行MetaSPR確認及體內外活性評價
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