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單分子質量光度分析系統助力蛋白質復合物的定量表征

瀏覽次數:480 發布日期:2024-11-26  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

單分子質量光度分析系統(Mass photometer)是全新的生物分子分析和表征系統,僅需極少量的樣品就能獲得生物分子在天然狀態下的質量分布,并且無需任何的標記和固定。該方法尤其適用于蛋白質復合物的分析和表征,并且越來越多的研究工作已經發表在高水平雜志上。今天,小編簡單介紹兩篇發表在Cell雜志上的科研工作,供大家借鑒參考。

2024年9月份,北京大學李晴教授聯合哈佛醫學院、霍華德休斯醫學研究院在Cell發表了題目為‘A replisome-associated histone H3-H4 tetramer chaperone required for epigenetic inheritance’的研究論文,證實了復制叉保護復合物Mrc1中存在與組蛋白H3-H4四聚體的結合區域。文章中,科學家們使用質量光度系統分別檢測了(H3-H4)2四聚體以及Mrc1-(H3-H4)2復合物的分子量分布,結果如圖1:

圖片

圖1 Mrc1-(H3-H4)2復合物與(H3-H4)2四聚體的結構預測圖及分子量分布圖

 
MP測量H3-H4二聚體以及其與Mrc1組成復合物的分子量分別為51kDa、82kDa,與理論分子53kDa和81.7kDa吻合的非常好。

10月25日,西奈山伊坎醫學院時毅教授聯合牛津大學章培君教授在Cell上報道了光譜抗病毒平臺AMETA,為解決現有疫苗和抗體治療過程中病毒的突變逃逸提供了全新的策略。AMETA平臺由雙特異性的納米抗體(Nb)和人Igm骨架構建而成,能夠同時靶向多個保守表位,將單個病毒的抗病毒效力提高了一百萬倍。


文章中,科學家們使用質量光度分析系統表征了5個IgM-Fc復合物與20個納米抗體組裝的多價體系,結果如圖2: 
  

圖片圖2 光譜抗病毒平臺AMETA示意圖與組裝體的分子量分布圖

 
數據表明:組裝體Nb-IgM-Fc與IgM-Fc五聚體的分子量相差約為300-400kDa,這個數值與20個納米抗體的分子量(單個納米抗體的分子量在15-20kDa左右)吻合的非常好。

與用于蛋白質復合物分析和表征的其他技術相比,單分子質量光度系統具備測量范圍廣(30kDa-5MDa),分辨率高(最高可達~25kDa),如果您也想快速分析和表征蛋白質復合物,聯系我們吧!


參考文獻:
1、A replisome-associated histone H3-H4 chaperone required for epigenetic inheritance, Cell, 2024,187:5010-50282、Adaptive multi-epitope targeting and avidity-enhanced nanobody platform for ultrapotent, durable antiviral therapy, Cell, 2024, doi: 10.1016/j.cell.2024.09.043
 

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