活細胞成像應用于藥物對血管生物學影響的研究
瀏覽次數:480 發布日期:2025-1-16
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研究背景:
本研究介紹了一個血管表型和蛋白質組學分析(VPT)平臺(一種用于血管生成研究的創新設備,可在開放的微流體環境中培養內皮層)通過使用抗血管藥對細胞骨架完整性和血管生成萌芽的影響,驗證VPT平臺可以利用3D形態學檢測核蛋白質分析結合,觀測萌芽數目以及藥物作用下蛋白質的變化。VPT平臺為深入了解與細胞周期、細胞骨架、細胞衰老和血管生成相關的信號通路提供了依據,加深我們對藥物對血管生物學影響的理解,以及后續對血管以外的其他模型的蛋白質組和核形態學特征的監測。
血管生成的檢測方式:
血管生成的核心過程是血管內皮細胞的增殖、遷移和管腔形成。使用活細胞成像技術,研究人員可以實時觀察血管內皮細胞如何響應生長因子的刺激,如何在組織中遷移并形成新的血管管腔。本文利用
Celloger Mini Plus實時監測48h內血管形態變化。
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在C通道中放入無細胞的水凝膠,更突出血管生成芽。
實驗過程:
利用內皮培養基培養人臍靜脈內皮細胞(HUVEC; Lonza),培養2天后形成內皮細胞單層,在C通道觀察到芽的長度達到通道C的20%時,分別使用靶向抑制VEGF,VEGFR,自噬和增殖的7種藥物處理,使用Celloger Mini Plus 密切監測藥物處理后48h內血管的芽長和芽數目的變化。 |
圖1.實驗流程示意圖
圖2.不同藥物處理下血管的形態
研究人員通過
Celloger Mini plus密切監測血管的生長狀態,通過成像設備發現貝伐珠單抗和卡博替尼治療誘導的變化顯示出相似的趨勢,而渥曼青霉素和紫杉醇治療顯示出顯著差異。發現紫杉醇具有最顯著的影響。證明形態學變化和蛋白表達差異之間的明確相關性,強調了細胞骨架蛋白改變和血管生成形態之間復雜相互作用。
綜上,
活細胞成像是研究血管生成的核心技術,可實時動態觀察內皮細胞的遷移、增殖和管狀結構形成過程,直觀揭示血管生成的動態機制。它還能追蹤關鍵分子信號(如VEGF等)的時空分布,研究微環境對血管生成的影響,并為抗血管生成藥物篩選提供高效手段。
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