自動采血系統是近年興起的臨床及實驗室血液采集及管理系統，可替代人工采血方法并優化采血作業流程，可有效控制采血過程對藥代動力學分析結果的影響。自動采血系統建立在精確的蠕動泵基礎上，有效控制流體的輸送，搭配同軸感應器確保收集到的是純血樣品。低漏失模式可把先采集的稀釋血液重新回補到動物體內，最大程度地減少動物血液量的丟失。自動采血系統可在動物清醒自由活動 狀態下完成連續在線取血，既降低了動物在取血過程中的緊張性，又保證了動物良好的生命狀態。大鼠血樣采集及檢測系統見圖 1。
 

圖 1.自由活動大鼠血樣采集及檢測系統
 

采用高效液相色譜-三重四級桿質譜聯用技術 (HPLC-QQQ-MS)測定血漿中青藤堿含量的方法：
SD大鼠頸總靜脈插管，待清醒后按40 mg·kg ^-1腹腔注射青藤堿，應用自動采血系統在大鼠自由活動狀態下采集樣品。血漿樣品中加入內標(磷酸可待因)，乙腈沉淀蛋白，流動相乙腈-水(含0.1%甲酸銨) 梯度洗脫。質譜采用電噴霧電離源(ESI)，掃描方式為多反應離子監測模式 (MRM)，定量分析離子對分別為青藤堿 m/z 330.0，磷酸可待因 m/z 300.0。利用 WinNonlin 軟件計算藥代動力學參數。

結果:
血漿中青藤堿在 5. 0 ～ 500. 0 μg·L ^-1線性關系良好，定量下限 1 μg·L ^-1，樣品處理方法的提取回收率 ＞ 88% ，日內及日間準確度 101. 08% ～ 111. 08% ，RSD 均 ＜ 10% ，穩定性良好。血漿中青藤堿的達峰時間( tmax )，藥峰濃度(Cmax )，藥時曲線下面積 (AUC0-24 h )，表觀分布容積(Vz /F)，清除率(CL/F)，平均駐留時間(MRT0-24 h )分別為(1. 65 ± 1. 48) h，(210. 43 ± 96. 35) μg· L^-1，(1 053. 80 ± 427. 69) h·μg·L ^-1，(252. 65 ± 57. 36) L·kg^-1，(30. 37 ± 11. 85) L·h^-1·kg^-1，(5. 15 ± 2. 47) h。

結論:
生物樣品的采集多采用傳統的眼眶取血、大鼠尾靜脈取血等，存在采集樣品不連續，易損失，采集的血液可能溶血、凝血，動物失血過多導致狀態欠佳等問題;藥動學結果分析則普遍采用經典房室模型作為模型擬合方法。本實驗采用自動采血技術從清醒自由活動大鼠頸靜脈取血，結合 HPLC-QQQ-MS 檢測方法分析大鼠單次腹腔注射青藤堿后血漿中藥物濃度，利用非房室模型模擬合青藤堿在大鼠體內的藥動學過程，提供客觀真實的藥代動力學參數，為青藤堿藥效-藥動學研究提供實驗依據。 應用自動采血系統采血全過程中，未觀察到大鼠有明顯不適反應，儀器對紅細胞比容(Hct) 監測的結果顯示，同一只大鼠連續采血的 24 h 內，Hct 無明顯下降，提示大鼠血液紅細胞體積比未因采血受到明顯影響，采集血液樣本為不含稀釋血的純血樣本。運用自動采血系統對大鼠進行血樣采集與傳統的大鼠眼眶取血和尾靜脈取血相比，具有采樣精度高、人為因素影響小、樣本易保存等優勢，使藥代動力學過程更真實準確。

文獻來源：趙小亮,李濤,劉洋,張美玉,陳躍等.基于自動采血系統與HPLC-QQQ-MS的青藤堿藥動學分析[R].中國實驗方劑學雜志.2015

 

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