神經(jīng)病理性疼痛（Neuropathic Pain）是由神經(jīng)系統(tǒng)損傷或疾病引發(fā)的慢性疼痛，其核心特征為疼痛程度與實(shí)際組織損傷不匹配，并伴隨自發(fā)性疼痛、痛覺(jué)過(guò)敏（Hyperalgesia）及痛覺(jué)超敏（Allodynia）。因其機(jī)制復(fù)雜、致殘性高且缺乏有效治療手段，已成為醫(yī)學(xué)與科研領(lǐng)域的重大挑戰(zhàn)。動(dòng)物模型是揭示疼痛機(jī)制和篩選藥物的關(guān)鍵工具，其中慢性坐骨神經(jīng)壓迫模型（CCI）和坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷模型（SNI）應(yīng)用最廣。

接下來(lái)介紹這兩種常見(jiàn)的神經(jīng)病理性疼痛造模方法，方便大家合理選擇實(shí)驗(yàn)方案，保障科研的高效開(kāi)展。

慢性坐骨神經(jīng)壓迫模型（CCI）
實(shí)驗(yàn)步驟：
① 大小鼠麻醉后，用無(wú)菌剪刀的尖端鈍性切開(kāi)皮膚，鈍性分離股二頭肌，暴露坐骨神經(jīng)主干。②  使用生理鹽水浸泡后的鉻制腸線在神經(jīng)干上間隔1 mm輕度結(jié)扎3次（力度以可見(jiàn)神經(jīng)微凹陷為度）。
③ 柔性閉合肌肉，縫合皮膚，術(shù)后監(jiān)測(cè)動(dòng)物活動(dòng)能力，避免結(jié)扎過(guò)緊導(dǎo)致肢體癱瘓。結(jié)扎力度需精準(zhǔn)，過(guò)度壓迫可阻斷神經(jīng)傳導(dǎo)，引發(fā)運(yùn)動(dòng)功能障礙。

Tip
大鼠結(jié)扎完畢，將下肢靜置幾分鐘，若靜脈變得比較清晰則表明結(jié)扎松緊度合適；如有充血現(xiàn)象，則表明結(jié)扎太緊了^[1]。

CCI造模前后大鼠痛閾變化情況^[2]

坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷模型（SNI）
實(shí)驗(yàn)步驟：
① 大小鼠麻醉后，用無(wú)菌剪刀的尖端鈍性切開(kāi)皮膚，鈍性分離股二頭肌，暴露坐骨神經(jīng)后，分離其三大分支（脛神經(jīng)、腓總神經(jīng)、腓腸神經(jīng)）。
② 使用生理鹽水浸泡后的結(jié)扎脛神經(jīng)與腓總神經(jīng)，需保留腓腸神經(jīng)完整，此步驟需極度謹(jǐn)慎避免觸碰腓腸神經(jīng)分支^[3]。
③ 用剪刀在結(jié)扎節(jié)上下方切斷神經(jīng)，優(yōu)先從神經(jīng)結(jié)扎節(jié)的近心端剪斷神經(jīng)，然后在結(jié)扎節(jié)遠(yuǎn)心端出剪斷神經(jīng)，避免牽扯神經(jīng)。
④ 柔性閉合肌肉，縫合皮膚。術(shù)后觀察足部外翻（脛神經(jīng)損傷標(biāo)志）及趾伸展障礙（腓總神經(jīng)損傷標(biāo)志）。

SNI造模前后小鼠痛閾變化情況^[4]

造模技術(shù)比較

CCI模型作為經(jīng)典的神經(jīng)病理性疼痛造模方法，具有機(jī)械痛與熱痛表型明確以及疼痛周期較長(zhǎng)的優(yōu)勢(shì)。然而，其結(jié)扎力度大小與不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物結(jié)扎力度能否保持一致是技術(shù)難點(diǎn)，需實(shí)驗(yàn)人員反復(fù)練習(xí)提高手感（建議結(jié)扎后神經(jīng)直徑縮小≤30%），以避免運(yùn)動(dòng)功能損傷導(dǎo)致的模型偏差。

相比之下，SNI模型通過(guò)選擇性神經(jīng)分支切斷，可快速實(shí)現(xiàn)機(jī)械痛閾值下降（術(shù)后1天下降顯著）且疼痛維持穩(wěn)定（≥28天），尤其適合長(zhǎng)期機(jī)械痛敏和藥物療效評(píng)估。但其手術(shù)流程更為精細(xì)，且造模后熱痛反應(yīng)微弱（熱板實(shí)驗(yàn)陰性），不適用于熱痛相關(guān)課題。

 

大鼠CCI造模前后背根神經(jīng)節(jié)和脊髓背角中WNT3a分子表達(dá)量和分布情況變化^[5]

在完成神經(jīng)病理性疼痛模型構(gòu)建后，可借助瑞沃德冰凍切片機(jī)（點(diǎn)擊跳轉(zhuǎn)了解更多產(chǎn)品信息）對(duì)模型小鼠的坐骨神經(jīng)、腰段背根神經(jīng)節(jié)、腰段脊髓背角及皮層、丘腦、前扣帶回、杏仁核等其他疼痛相關(guān)腦區(qū)進(jìn)行組織切片制備。

通過(guò)這一操作，能夠進(jìn)一步剖析神經(jīng)病理性疼痛相關(guān)組織在分子層面的特征性變化，為深入開(kāi)展疼痛發(fā)生的具體機(jī)制研究及神經(jīng)環(huán)路解析提供關(guān)鍵的形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：
[1]    馬騁, 李翠賢, 易建良, 等. 不同材料制備大鼠神經(jīng)病理性疼痛CCI 模型的比較. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào), 2008, 24(4): 555-557.
[2]    Xu N, Wu MZ, Deng XT, et al. Inhibition of YAP/TAZ Activity in Spinal Cord Suppresses Neuropathic Pain. J Neurosci. 2016;36(39):10128-10140.
[3]    Richner, M., Bjerrum, O.J., Nykjaer, A., Vaegter, C.B. The Sparenjury (SNI) Model of Induced Mechanical Allodynia in Mice. J. Vis Exp. (54), e3092, doi:10.3791/3092 (2011).
[4]    Sorge RE, Mapplebeck JC, Rosen S, et al. Different immune cells mediate mechanical pain hypersensitivity in male and female mice. Nat Neurosci.
[5]    Zhang YK, Huang ZJ, Liu S, Liu YP, Song AA, Song XJ. WNT signaling underlies the pathogenesis of neuropathic pain in rodents. J Clin Invest.