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微量熱泳動儀MST幫助揭示植物重要肽激素的作用機理

瀏覽次數:4241 發布日期:2016-1-14  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

微量熱泳動儀MST用戶清華大學生命科學學院柴繼杰教授研究組、中科院遺傳與發育研究所楊維才研究員研究組合作在《Nature》上發表《植物肽激素phytosulfokine受體的別構激活機制》(Allosteric receptor activation by the plant peptide hormone phytosulfokine)研究論文(Nature 2015, 525, 265-268),揭示了植物重要肽類激素phytosulfokine (PSK) 的識別和受體激活分子機理。

植物肽類激素,同植物經典激素一樣,對植物體的生長發育等生理活動具有重要的調控作用。PSK是較早被發現和研究的一種含兩個酪氨酸磺化修飾的五肽激素,在植物的生長發育、抗逆和先天免疫等方面有廣泛調控作用。PSK發揮活性是通過與細胞膜上的受體激酶PSKR結合來發揮功能。但PSK被受體PSKR識別的分子機理以及后續的受體激活機制還需闡明。

柴繼杰研究組通過解析PSKR胞外區結合PSK的復合物結構,闡明了PSKR胞外區通過其島區來識別PSK的分子機理。深入的結構分析提示SERK家族成員可能作為共受體參與PSKR的受體激活,體外生化實驗初步證實了這一假設,同時通過與中科院遺傳與發育研究所楊維才研究員研究組合作,利用植物體內生化和遺傳學的方法最終證明了這一假設。這也是通過結構生物學提示找到PSK信號轉導通路上的新成份。通過解析和對比分析PSKR/PSK/SERK三元復合物結構和單獨的PSKR結構,揭示了PSK通過誘導原本無序的受體PSKR島區產生與共受體SERK結合的新界面通過

Nanotemper公司的微量熱泳動儀(MST)研究人員測量出PSKR與PSK的親和能力(Kd:1.55 µM)明顯強于無磺化修飾的dPSK(Kd:41.5 µM),與體內數據一致(圖 a)。此外研究人員還使用MST確定了PSKR上多個對識別PSK至關重要的氨基酸(圖 b)。

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