傷口愈合遷移實(shí)驗(yàn)怎樣劃出標(biāo)準(zhǔn)筆直的方法和應(yīng)用
傷口愈合和遷移試驗(yàn)的應(yīng)用
細(xì)胞遷移發(fā)生在許多重要的生理過程中。例如，受控的細(xì)胞遷移允許胚胎發(fā)育、組織損傷和傷口愈合。相反，細(xì)胞遷移在許多病理情況下失調(diào)，例如癌癥轉(zhuǎn)移和炎癥。毫不奇怪，細(xì)胞遷移背后的原理已在許多情況下得到研究。
傷口愈合測定和遷移測定是廣泛用于分析不同條件下細(xì)胞遷移的方法。他們深入了解以下相關(guān)科學(xué)主題：
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條件遷移和傷口愈合研究：細(xì)胞如何在不同條件下遷移（例如，用特定化合物/增強(qiáng)劑/抑制劑處理后，使用 siRNA 或 CRISPR/Cas9 進(jìn)行基因沉默后，改變底物剛度后，或改變基質(zhì)組成后)?
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高通量藥物篩選：哪種藥物會(huì)改變特定細(xì)胞類型（例如癌細(xì)胞）的遷移率？
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細(xì)胞相互作用研究：細(xì)胞是保持接觸還是單獨(dú)遷移？細(xì)胞在遷移過程中如何相互作用？什么是細(xì)胞自主遷移能力？
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2D Invasion Assays：兩種不同的細(xì)胞類型如何相互作用（例如，腫瘤細(xì)胞和成纖維細(xì)胞）？
抑制劑或促進(jìn)劑對(duì)傷口愈合影響的實(shí)例分析。
與一般傷口愈合和遷移測定相比，定向遷移測定（例如趨化性測定）測量 2D 或 3D 環(huán)境中的梯度依賴性細(xì)胞運(yùn)動(dòng)。
如何進(jìn)行傷口愈合試驗(yàn)/遷移試驗(yàn)
傷口愈合測定/遷移測定的最具特征的讀數(shù)是細(xì)胞覆蓋區(qū)域（間隙閉合）隨時(shí)間的變化。進(jìn)行傷口愈合和遷移試驗(yàn)是一個(gè)簡單的過程：
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在細(xì)胞單層內(nèi)創(chuàng)建一個(gè)物理間隙。
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通過活細(xì)胞成像或在不同時(shí)間點(diǎn)拍照來監(jiān)測細(xì)胞遷移到間隙的過程。
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手動(dòng)或使用自動(dòng)化軟件分析間隙閉合率，這是典型的實(shí)驗(yàn)讀數(shù)。
ibidi Culture-Insert 2 孔| 3 孔| 4孔是硅膠插件，具有明確的無細(xì)胞間隙，用于傷口愈合、遷移、2D 侵襲檢測和細(xì)胞共培養(yǎng)。
盡管傷口愈合試驗(yàn)明顯簡單，但許多因素會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，因此必須加以控制。在以下部分中，您將了解傷口愈合檢測的原理和設(shè)置。此外，我們將討論 需要標(biāo)準(zhǔn)化的參數(shù)，以實(shí)現(xiàn)可重現(xiàn)的、穩(wěn)健的結(jié)果。
使用 ibidi Stage Top 孵育系統(tǒng)的活細(xì)胞成像顯示了 MCF7 細(xì)胞在傷口愈合和遷移試驗(yàn)中的間隙閉合。相襯; 10 倍物鏡。
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