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sciencelight 生物發光肺癌細胞系
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產地/品牌:sciencelight產品類別:細胞株/菌種
規       格:sciencelight 最后更新:2021-12-1
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為促進活體成像技術在肺癌研究領域的應用,我們最近用熒光素酶基因標記了肺癌細胞系SPC-A-1、LTEP-a-2、NCI-H1299(高轉移)、NCI-H1975(高轉移)以及A549以及其6株骨轉移亞系。研究者可以應用這些細胞建立皮下、原位和轉移模型進行肺癌相關的研究。

這些細胞均采用逆轉錄病毒(自制含熒光素酶和GFP的逆轉錄病毒)進行標記,標記和轉染的過程粗略如下:

 

1.感染前消化細胞并計數,將細胞鋪于10cm培養皿中,確保感染前細胞達到20%-30%的匯合度。

2.取4ml含逆轉錄病毒的培養基,加入40ul 10mg/ml的polybrene混合以0.45um濾膜過濾后加入細胞中。晃勻,37度孵化過夜。

3.移去含有逆轉錄病毒的培養基,加入10ml完全培養基,37度正常培養12小時。

4.重復2-3步,2-3個循環后用GFP的FACS篩選陽性細胞。

5.陽性細胞系鑒定: 取1×104細胞,用裂解液裂解,加入熒光素酶作用底物,將轉染質粒的細胞與陰性,陽性對照共同進行單報告基因檢測。

 

 

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