Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase是Hieff UNICON® Taq抗體（貨號：31301ES）和Hieff® Taq DNA Polymerase（貨號：10101ES）的混合產(chǎn)品。Hieff UNICON®Taq抗體與Hieff® Taq DNA Polymerase具有很高的親和力，高溫50℃處理30 min，依舊可以封閉Hieff® Taq DNA Polymerase的活性。本品在預(yù)變性溫度下加熱30 sec完全失活，釋放出DNA聚合酶活性。使用該熱啟動Taq酶可以有效抑制引物非特異性退火導(dǎo)致的擴增。 

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase適用于熱啟動PCR和qPCR。本品中的Hieff® Taq DNA Polymerase是熱穩(wěn)定重組型DNA聚合酶，具有較高的模板親和力，非常適合低拷貝模板的擴增。擴增產(chǎn)物具有3′-dA，可輕松克隆T載體。

產(chǎn)品組分

產(chǎn)品應(yīng)用

低拷貝基因擴增、基因型鑒定

活性定義

用活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物，74℃，30 min內(nèi)，攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為1個活性單位（U）。

運輸與保存方法

冰袋運輸。-20℃保存，有效期2年。

PCR反應(yīng)體系（50 μL）

【注】：

1）試劑使用：各組分使用前需充分融化混勻。

2）聚合酶濃度：推薦使用2.5 U/50 μL。可以在1.25-5 U/50 μL之間進行優(yōu)化。

3）Mg2+終濃度：體系終濃度為2 mM。如有特殊需要，可用25 mM MgCl2，以0.2-0.5 mM為間隔向上摸索。

4）不同模板的推薦使用量（50 μL反應(yīng)體系）：

PCR擴增程序

【注】：

1）退火溫度和時間：溫度推薦使用50-60℃。退火溫度過低會導(dǎo)致非特異性擴增。引物設(shè)計參考熒光定量引物標準。推薦退火時間設(shè)置為20 sec，可以在10-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié)。

2）延伸溫度和時間：溫度推薦使用72℃。時間推薦使用30 sec/kb。

3）擴增產(chǎn)物：請將PCR擴增產(chǎn)物放置于-20℃保存，防止DNA發(fā)生降解。

4）擴增程序：本產(chǎn)品用于定量實驗，可使用2步法程序擴增，去掉延伸步驟，退火和延伸合為一步，對應(yīng)的時間常用30 sec或根據(jù)儀器型號設(shè)置，如Applied Biosystems 7300需用31 sec以上。

注意事項

為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

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