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兔轉(zhuǎn)錄因子ELISA試劑盒吸附測定實驗原理:
將目標(biāo)抗體包被于微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入微生物化的目標(biāo)抗體,將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標(biāo)記和親和素,再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
兔轉(zhuǎn)錄因子ELISA試劑盒吸附測定試劑盒組成:
試劑盒操作步驟:
實驗所需自備試驗器材:
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
實驗結(jié)果計算:
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
試劑盒性能:請向客服人員索要詳細(xì)電子版說明書!
技術(shù)小提示:
1. 當(dāng)混合或重溶蛋白溶液時,盡量避免起沫。
2. 為了避免交叉感染,配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽。
3. 每次孵育時,請正確使用封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4. 混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無色,請避光保存;假如微孔板后,將由物色變成不同深度的藍(lán)色。
5. 終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致;加入終止液后,孔內(nèi)顏色由藍(lán)變黃;若孔內(nèi)有綠色,則表明孔內(nèi)液體未混勻;請充分混合。
合作單位:高校/醫(yī)院/科研院;
實驗類型:夾心法/間接法/競爭法;
反應(yīng)時間: 1-5h
所需樣本體積: 50-100ul
檢測波長: 450 nm
特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。
應(yīng)用范圍:用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本;
保存條件:2-8℃;
鄭重聲明:本產(chǎn)品僅供科研實驗,不適用于臨床診斷!
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