Renilla luciferase之底物腔腸素Coelenterazine
CAS 編號：55779-48-1
貨號：luc006
分子式：C26H21N3O3
分子量: 423.48 g/mol
純度：98%
保存：-20°C避光，保存在惰性氣體下
Coelenterazine，在水生生物中（例如海腎、海蜇、水螅等）發現的天然腔腸素可作為很多熒光素酶（包括海腎熒光素酶Rluc）的作用底物，可用于活細胞中鈣離子濃度檢測、報告基因分析、BRET（生物發光共振能量轉移）研究、ELISA、HTS、組織或細胞中超氧陰離子和過亞硝酸鹽的化學發光檢測。
與甲蟲熒光素/熒光素酶系統不同，腔腸素/熒光素酶系統不需要三磷酸腺苷(ATP)，因此更便于體內生物熒光的研究。目前研究得最透徹的以腔腸素為底物的熒光素酶來源于海腎（Renilla）， 即海腎熒光素酶 (Renilla Luciferase，簡稱Rluc)。 活體成像實驗中除Firefly Luciferase外，有時也會用到Renilla Luciferase（海腎熒光素酶，編碼基因是Rluc），底物正是coelentarizine。作用原理是以腔腸素為底物的熒光素酶在有分子氧的條件下，氧化腔腸素產生高能量的中間產物， 并在此過程中發射藍色光，所發的光波長在 460~540nm左右。發光的波長低于firefly luciferase的，而且特異性也不好。但是，如果實驗設計需要標記兩種細胞（比如一種腫瘤細胞和一種干細胞）或者標記一種細胞一種基因，就需要有兩種可以分別檢測的報告基因。Firefly luciferase和renilla luciferase正好可以滿足這樣的要求，可以分別用不同的底物（D-luciferin，potassium salt和Coelenterazine）分別激活發光。
腔腸素也是以水母發光蛋白為代表的海洋發光蛋白的輔助因子。在一個以熒光素/熒光素酶系統為基礎略作改變的系統中，水母發光蛋白穩定的結合了處于反應狀態的腔腸素，氧化反應在水母發光蛋白與鈣離子結合后開始進行。這種對鈣離子的反應是不依賴于氧氣的，水母發光蛋白所發射的藍色光的量和酶濃度及Ca++ 濃度成正比。這種特性使得腔腸素可作為熒光素酶、氧氣及鈣離子的檢測試劑。 水母發光蛋白/腔腸素系統與熒光鈣離子指示劑相比，在檢測鈣離子方面具有以下優點： 可檢測較大范圍的鈣濃度 – 從0.1uM 至 >100uM；樣品無自體熒光，背景熒光低于使用熒光鈣離子指示劑；雖然信號比使用熒光鈣離子指示劑弱，但是通過成像儀器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的靈敏度。由于水母發光蛋白復合體不會被運輸到細胞外，所以可進行數小時至數天的鈣離子的觀測。
