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miRNA是在真核生物中發(fā)現(xiàn)的具有調(diào)控功能的內(nèi)源性非編碼RNA，大小約20~25個核苷酸。
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實驗原理
miRNA是在真核生物中發(fā)現(xiàn)的具有調(diào)控功能的內(nèi)源性非編碼RNA，大小約20~25個核苷酸。我們根據(jù)成熟miRNA序列信息，合成含有莖環(huán)結(jié)構(gòu)的前體miRNA連接至含側(cè)翼序列的表達載體中，將其轉(zhuǎn)染/病毒包裝感染進入細胞后，由II型啟動子（CMV）啟動表達，經(jīng)核酸酶的剪切加工，組裝RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體，通過堿基互補配對的方式識別靶mRNA，并根據(jù)互補程度的不同指導(dǎo)沉默復(fù)合體降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻譯。
實驗流程
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