TMT標(biāo)記定量技術(shù)

TMT labeling quantification

TMT (iTRAQ) 最高可同時(shí)標(biāo)記10 (8) 組不同的生物樣品，且一次性完成全部樣品的定性定量分析，顯著的提高了實(shí)驗(yàn)通量，降低了定量誤差，可發(fā)現(xiàn)更細(xì)微的生物學(xué)差異。

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最后更新：	2018-11-26	半年訪問(wèn)：	53
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TMT標(biāo)記定量技術(shù)

Thermo Scientific^TM公司的TMT (Tandem Mass Tag) 標(biāo)記定量技術(shù)和AB SCIEXTM公司的iTRAQ技術(shù)都屬于二級(jí)報(bào)告離子定量技術(shù)，具有相似的原理（圖1）：提取樣品中的總蛋白并酶解為多肽，多肽N-term以及末端Lysine側(cè)鏈基團(tuán)的游離氨基能夠與TMT標(biāo)簽進(jìn)行共價(jià)結(jié)合，從而使每條多肽都帶上至少一個(gè)TMT標(biāo)簽；不同TMT標(biāo)簽具有相同的分子量，但是卻有不同的同位素分布，來(lái)自不同樣品的相同多肽在MS1中同時(shí)被分離，經(jīng)裂解后在MS2中釋放出reporter，代表該多肽在對(duì)應(yīng)樣品中的相對(duì)含量。 TMT (iTRAQ) 最高可同時(shí)標(biāo)記10 (8) 組不同的生物樣品，且一次性完成全部樣品的定性定量分析，顯著的提高了實(shí)驗(yàn)通量，降低了定量誤差，可發(fā)現(xiàn)更細(xì)微的生物學(xué)差異。

圖1. TMT標(biāo)簽結(jié)構(gòu)和定量原理。

技術(shù)優(yōu)勢(shì)
• 通量與深度的完美結(jié)合：在質(zhì)譜本身高通量的基礎(chǔ)上，TMT技術(shù)又進(jìn)一步擴(kuò)大了這種優(yōu)勢(shì)，相比SILAC、Dimethyl等標(biāo)記定量技術(shù)，TMT可同時(shí)完成多至10個(gè)不同樣品的定量分析；運(yùn)用high pH反相HPLC分級(jí)為8個(gè)組分，每個(gè)組分再經(jīng)low pH反相HPLC分離，兩次正交液相分離，顯著的提高了鑒定和定量深度。
• 特異性與靈敏度兼?zhèn)洌夯谫|(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)精確到單個(gè)氨基酸位點(diǎn)，蛋白鑒定準(zhǔn)確，靈敏度高，是profiling分析和PTM研究的強(qiáng)大工具。
• 嚴(yán)格的質(zhì)量控制：數(shù)據(jù)穩(wěn)定、重現(xiàn)性好，定量動(dòng)態(tài)范圍廣，多個(gè)樣品平行處理極大的降低了實(shí)驗(yàn)誤差。
• 專業(yè)的數(shù)據(jù)分析：標(biāo)準(zhǔn)的搜庫(kù)流程，專業(yè)的統(tǒng)計(jì)和生信分析，出版級(jí)的圖表展示，完整全面的分析報(bào)告。

樣品要求

樣品類型	樣品要求
蛋白質(zhì)提取物	濃度 >1μg/μl，蛋白質(zhì)總量 >200μg
細(xì)胞樣品	細(xì)胞量 >5×10⁶
組織樣品	動(dòng)物、微生物組織濕重 >100mg
體液樣品	血液體積 >500μl，血清、血漿、腦脊液 >500μl，尿液 >50ml

技術(shù)流程

應(yīng)用領(lǐng)域
• 疾病標(biāo)志物篩選
• 分子機(jī)制研究
• 藥物作用靶點(diǎn)研究
• 特殊功能蛋白質(zhì)篩選

儀器平臺(tái)
Thermo Scientific EASY-nLC 1200
Thermo Scientific Q Exactive

上海康成生物工程有限公司
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上海康成生物工程有限公司自2002年起專注于生物科研技術(shù)服務(wù)，是國(guó)內(nèi)最早一批專業(yè)提供生命科學(xué)前沿研究技術(shù)服務(wù)的高科技企業(yè)。為進(jìn)一步拓展在醫(yī)學(xué)科研服務(wù)領(lǐng)域業(yè)務(wù)的深度和廣度，向多譜領(lǐng)域發(fā)展，重塑品牌 Aksomics（數(shù)譜生物）。Aksomics全面整合公司在非編碼RNA（lncRNA、circRNA、small RNA等）、表觀遺傳學(xué)、蛋白組學(xué)等檢測(cè)方向的核心技術(shù)，依靠自身優(yōu)秀的研發(fā)、技術(shù)、營(yíng)銷和服務(wù)團(tuán)隊(duì)，憑借國(guó)際領(lǐng)先的技術(shù)平臺(tái)和高標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)控體系，形成了涵蓋表觀基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)及代謝組學(xué)等各個(gè)研究領(lǐng)域的一站式技術(shù)平臺(tái)。

【表觀基因組學(xué)】 DNA甲基化芯片、DNA羥甲基化芯片、染色質(zhì)免疫共沉淀芯片、DNA甲基化測(cè)序、DNA羥甲基化測(cè)序、染色質(zhì)免疫共沉淀測(cè)序、MeDIP-PCR、hMeDIP-PCR、ChIP-PCR等

【轉(zhuǎn)錄組學(xué)】LncRNA芯片、LncPath™芯片、環(huán)狀RNA芯片、T-UCR芯片、microRNA芯片、piRNA芯片、全基因組表達(dá)譜芯片、RNA測(cè)序、RNA m6A甲基化測(cè)序、small RNAs測(cè)序系列（microRNA測(cè)序、tRF&tiRNA測(cè)序、snoRNA測(cè)序、piRNA測(cè)序等）、LC-MS tRNA修飾檢測(cè)、 nrStar™ ncRNA PCR芯片（tRF&tiRNA，tRNA，snoRNA，F(xiàn)unctional LncRNA）、miRStar™癌癥特異性microRNA PCR芯片、NuRNATM mRNA PCR芯片、功能分類PCR芯片、LncRNA實(shí)時(shí)定量PCR、環(huán)狀RNA實(shí)時(shí)定量PCR、tRF&tiRNA實(shí)時(shí)定量PCR、microRNA實(shí)時(shí)定量PCR、mRNA實(shí)時(shí)定量PCR

【蛋白組學(xué)平臺(tái)】TMT標(biāo)記定量蛋白組學(xué)服務(wù)、Lable-free定量蛋白組學(xué)服務(wù)、磷酸化修飾蛋白組學(xué)服務(wù)、泛素化修飾蛋白組學(xué)服務(wù)、N-糖基化修飾蛋白組學(xué)服務(wù)、乙酰化修飾蛋白組學(xué)服務(wù)、蛋白-蛋白相互作用組學(xué)

【代謝組學(xué)】靶向代謝組學(xué)、非靶向代謝組學(xué)

【外泌體組學(xué)】外泌體轉(zhuǎn)錄組學(xué)、外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)、外泌體代謝組學(xué)
康成生物為Agilent、Arraystar、Exiqon、Illumina、Qiagen、Thermo Fisher等國(guó)際知名品牌提供技術(shù)服務(wù)。康成客戶采用各類技術(shù)服務(wù)發(fā)表的SCI論文已超560篇。康成生物將持續(xù)聚焦生命科學(xué)發(fā)展的挑戰(zhàn)，提供有競(jìng)爭(zhēng)力的產(chǎn)品和服務(wù)，持續(xù)為客戶創(chuàng)造最大價(jià)值。

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