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酵母細胞表達|酵母細胞表達系統(tǒng)|蛋白表達
金開瑞生物擁有分子生物學、蛋白質組學、蛋白表達、抗體制備、試劑盒合作開發(fā)、檢測分析等六大服務平臺,專業(yè)為生物技術領域的科研人員提供高質量的生物技術外包服務。
服務類別:分子與細胞總訪問:881
最后更新:2017-5-3半年訪問:31
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服務商: 武漢金開瑞生物工程有限公司 查看該公司所有服務 >>
  • 服務介紹
  • 公司簡介

  酵母表達系統(tǒng)是一種最經濟高效的真核蛋白表達系統(tǒng),可以成功實現(xiàn)胞內表達或是分泌表達,且其放大培養(yǎng)基相對廉價,培養(yǎng)條件要求不高,適宜工業(yè)放大。與哺乳動物細胞表達系統(tǒng)一樣,酵母蛋白表達系統(tǒng)能夠對所表達蛋白進行例如糖基化、酰基化、脂基化、磷酸基化等保證蛋白天然構象的修飾,可用于制備非常接近天然蛋白的具有高附加值的蛋白原料。

  武漢金開瑞生物工程有限公司的酵母蛋白表達平臺由多年從事酵母表達操作的實驗人員組成,經驗豐富,采用自行改造的高效分泌載體和宿主組合,可在程度上實現(xiàn)質量的蛋白表達。經客戶反饋,以我平臺所制備的蛋白原料為抗原所制備的單抗均具有很好的識別天然蛋白的優(yōu)良特性。

 

一、服務特色

1、專利的Biobrick技術,可以實現(xiàn)高效體外構建任意拷貝的基因劑量,實現(xiàn)表達量的提高,可成功用于工業(yè)菌種的改良優(yōu)化。

2、采用自行改造的高效分泌載體:pPIC9K、pPIC9K高效融合載體、pPICZA、pGAPZa、pPaSUMO3,宿主GS115、KM71、X33的正交組合。PINK系統(tǒng)優(yōu)化分泌表達信號肽。胞內表達采用自行改造的載體pPIC 3.5k載體和宿主GS115、KM71、X33的組合,可在程度上實現(xiàn)表達。

3、高效的種子篩選工作能使您所定制的蛋白在最短的時間內獲得盡可能高的產量。

 

二、服務說明

服務流程

接受訂單——合 成——純 化——分 裝——質 檢——發(fā) 貨——客戶提供

目的蛋白信息或基因序列,質粒(也可以選擇由金開瑞提供);

蛋白詢價信息表(請點擊下載中心,下載蛋白詢價信息表后詳細填寫)。

最終交付

純化后蛋白純品、表達菌株(收費);

蛋白表達結題報告,包括測序報告、實驗條件、蛋白表達純化檢測結果。

 

金開瑞生物擁有成熟的酵母表達技術,有需要的客戶可以qq聯(lián)系我:3013422302。

 

三、服務周期及報價

四、案例展示

案例1:經濟型套餐

  以下是通過我平臺自行改造的pPIC9K載體和GS115宿主系統(tǒng)成功表達一種酶的經濟型套餐實例。自接到訂單至成功表達只用了20個工作日,親和層析一步純化得到蛋白純度在95%以上。

案例2:標準型套餐

  以下是一個需要做優(yōu)化表達的標準型訂單服務,客戶要求表達一種藥用蛋白,最后做工藝放大,對表達量有一定的要求,客戶自己做了大量的工作但是表達量一直提不上去,我們從上游開始做表達優(yōu)化,用了50個工作日,用我平臺自己改造的pPIC9K載體和KM71H宿主在2.5mg/ml的G418濃度下獲得一株令客戶滿意的工藝放大種子。

Fig. C: Expression and secretion of pharmaceutical protein from P.pastoris.

Lane 1 :Expression level from customer.

Lane 2 :Expression level from Genecreate.

Lane 3 :Negative control.

Fig. D: Purification of the target pharmaceutical protein by SP-Sepharose.

 

案例3:工業(yè)菌株改良優(yōu)化

  以下是我平臺成功完成的一個工業(yè)酶菌種對產量的優(yōu)化提高工作,利用專利的Biobrick技術一共用了近60個工作日由單拷貝基因劑量構建到8拷貝的基因劑量,表達量由開始的0.5g/L的水平提高到2.4g/L的水平,提高了近5倍。

        Fig. E: single copy gene expression of industrial enzyme from P.pastoris.

        Fig. F: eight copy gene expression of industrial enzyme from P.pastoris.

備注:我們只提供抗HIS標簽抗體用于表達產物的質控,客戶要求用對應蛋白的抗體做western blot,則抗體由客戶自行提供。

  專利的Biobrick技術是集蛋白的高效表達和高活性于一體的新技術,以下是我們成功為一家知名公司開發(fā)的診斷試劑原料,經客戶同意,我們公開下列數(shù)據(jù):

備注:以上是利用化學發(fā)光平臺開發(fā)的試劑盒過SFDA的panel結果:

其線性相關性如下:

如您對我們的酵母表達及其系統(tǒng)感興趣或者需要技術支持,請您與我聯(lián)系QQ:3013422302 ,或者瀏覽我們公司的網站http://www.genecreate.cn/,可以搜索到您想要的服務信息,武漢金開瑞生物工程有限公司期待和您的合作。

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