BTP-基于iTRAQ的定量蛋白組分析

iTRAQ (Isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation)即等重標簽標記用于蛋白質相對和絕對定量技術。它是美國Applied Biosystems公司研發的蛋白質組定量專利技術。該技術可實現對多種不同樣品中蛋白的比較，如用于研究不同病理條件下或者不同發育階段的組織樣品中蛋白質表達水平的差異。 來自不同樣品的同一肽段經 iTRAQ 試劑標記后具有相同的質量數，并在一級質譜檢測(MS1)中表現為同一個質譜峰。當此質譜峰被選定進行碎裂后，在二級質譜檢測(MS2)中，不同的報告基團被釋放，它們各自的質譜峰的信號強弱，代表著來源于不同樣品的該肽段及其所對應的蛋白的表達量的高低。

百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF質譜平臺，Orbitrap Fusion質譜平臺，Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，推出基于iTRAQ的定量蛋白組分析服務技術包裹，您只需要將您的實驗目的告訴我們并將您的蛋白寄給我們，我們會負責項目后續所有事宜，包括蛋白酶切、肽段標價、肽段分離、質譜分析、質譜原始數據分析、生物信息學分析。

關于樣品

1. 如果您提供的是組織樣品，請您干冰將組織樣品寄給我們；植物組織樣本最少200mg，血液樣品至少1ml(血漿注意用EDTA防凝)，血清0.2-0.5ml，尿液2ml，動物組織樣品至少1g，細胞樣品為1X107個細胞，酵母、微生物等干重200mg。

2. 如果您提供的是蛋白樣品，請您保證蛋白總量在100ug以上；蛋白提取時使用普通的組織、細胞裂解液即可。

3. 樣品運輸：請使用足量的干冰運輸，并且盡量選用較快的郵遞方式，以降低運輸過程中樣品降解的可能性。

一站式服務

您只需下單-寄送樣品

百泰派克一站式服務完成：樣品處理-上機分析-數據分析-項目報告

對于可以傳代的細胞樣品來說，我們可以采取SILAC的方法完成對于細胞蛋白質組的標記過程，但是許多其他研究體系，比如組織樣品以及不能進行傳代培養的細胞來說，需要其他的標記方法來完成定量蛋白組學分析。iTRAQ技術就是基于此實驗需求建立起來的體外（in vitro）標記技術。

iTRAQ試劑包括三部分：

1. 報告基團（reporter group）：相對分子量為113-121Da（無120），因此iTRAQ試劑可同時標記8組樣品。

2. 平衡基團（balance group）：相對分子量為192-184Da (無185)，使得八種iTRAQ試劑分子量均為305 Da，保證標記的同一肽段m/z相同。

3. 肽反應基團：能與肽段N端及賴氨酸側鏈氨基發生共價連接，從而標記上肽段 拿到蛋白樣品之后，不同組的樣品首先分別進行等量酶切，每一個酶切得到的肽段樣品選擇一種標記試劑進行標記反應（每一個肽段至少含有一個游離的氨基進行反應）；然后將經過不同標記的肽段樣品混合后進行后續的質譜分析。

來自不同樣品的同一肽段經iTRAQ試劑標記后具有相同的質量數，并在一級質譜檢測（MS1）中表現為同一個質譜峰。當此質譜峰被選定進行碎裂后，在二級質譜檢測（MS2）中，不同的報告基團被釋放，它們各自的質譜峰的信號強弱，代表著來源于不同樣品的該肽段及其所對應的蛋白的表達量的高低。

基于iTRAQ的定量蛋白組研究路線

中/英文項目報告

在最終的技術報告中，百泰會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告，報告包括：

1, 實驗步驟（中英文）

2, 相關的質譜參數（中英文）

3, 鑒定物質的信息

4, 原始數據

5, 生物信息學分析