糖基化分析是最具挑戰性的翻譯后修飾分析之一。糖基化修飾通常是以基團為單位，而非單個修飾。即使是蛋白質上的單個糖基化位點，也可能具有不同的鏈長和連接不同分支的多種聚糖異構體。O-糖基化（O-Glycan，也稱O糖，O聚糖）主要通過末端單糖殘基與絲氨酸或蘇氨酸的OH基之間的糖苷鍵與多肽連接。O糖連接的氨基酸的共有序列尚不清楚，且O糖的結構多樣，可以分為具有相對異質核心結構的幾個結構家族。

O-連接聚糖的不同核心結構

與N-糖不同的是，目前還沒有能消化大多數O糖的通用酶。O-聚糖酶僅可酶解未被取代的O-GalNAc雙糖起始的聚糖。因此，通過化學法對O-聚糖進行水解是更通用的方法，大部分O-聚糖可從O-糖肽釋放，即β-脫除。

糖分析中樣品制備的一般流程

可使用MALDI-TOF MS對O-聚糖進行分析，通過對衍生化反應后甲基化的O-聚糖進行分析，從而將所有羥基轉化為甲基醚，并通過對羧基上的唾液酸進行甲酯化進行穩定后，使得MALDI TOF MS可以在正離子模式下對O-糖進行分析。對甲基化的O-糖進行質譜分析，便可獲得有關聚糖組成的信息。

基于質譜的O聚糖分析示意圖

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1. 實驗步驟（中英文）
2. 相關的質譜參數（中英文）
3. 質譜圖片
4. 原始數據
5. O-糖分析結果

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