Pull-down靶蛋白質譜鑒定服務
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服務商: 北京百泰派克生物科技有限公司 | 查看該公司所有服務 >> |
在生物體的生命活動中,蛋白質的功能是通過蛋白質與蛋白質之間的相互作用來實現的。因此,研究新的蛋白互作可以為研究蛋白質的潛在功能提供新的方向。在諸多蛋白互作鑒定實驗中,Pull-down常用于體外蛋白互作檢驗,以及幫助發現新的互作蛋白。Pull-down實驗利用高度純化且富集的誘餌蛋白捕獲在細胞中相互作用較弱或豐度低的靶蛋白,大幅度提高發現新靶蛋白的效率。Pull-down實驗的具體步驟為:表達純化GST、polyHis或Biotin標記的誘餌蛋白,使用固定化親和配體將誘餌蛋白與固相基質穩定結合,再將誘餌蛋白與待測細胞裂解液進行混合孵育,在這一過程中,誘餌蛋白與目標蛋白相互作用并結合在一起,通過清洗除去非特異性結合的雜蛋白,即可獲得與誘餌蛋白相互作用的目標蛋白,再通過質譜分析對目標蛋白進行鑒定。
百泰派克公司利用進口的GST pull-down試劑盒,能夠快速準確的完成蛋白互作實驗,結合公司先進的UPLC-MS質譜平臺,推出基于pull down的蛋白分析一站式技術服務,靈敏度高、分辨率準確。我們既可以為您pull down實驗后的蛋白樣品進行檢測,也可以您寄來樣品,我們從pull down實驗到樣品質譜分析一站式解決。您只需要將您的需求和樣品寄給我們,我們會負責項目后續所有事宜,包括樣品前處理、pull down、質譜分析、質譜原始數據分析。
Pull-down蛋白質鑒定流程Pull-down蛋白質鑒定流程
關于樣品1D SDS PAGE /2D PAGE gels樣品:
1. Coomassie Blue, SYPRO Ruby以及Silver stain樣品均可進行蛋白的鑒定試驗;
2. 銀染的樣品有可能與后續的質譜分析不兼容,我們推薦您使用下面的產品或者實驗步驟進行銀染實驗:
ProteoSilver Plus, Sigma (Product # PROTSIL1 or PROTSIL2)
Dodeca Silver Stain, BioRad (Product # 161-0481 or 161-0480)
3. 銀染的樣品請不要進行脫色處理
液體樣品(In solution format):
1. 如果您洗脫的樣品需要跑膠,請按照1D SDS PAGE樣品準備要求準備樣品即可;
2. 假如樣品中蛋白量>10ug,我們對樣品的緩沖體系沒有要求;
3. 假如樣品中蛋白量<10ug,樣品準備過程中盡量減少SDS等表面活性劑的使用,并注意降低鹽濃度;
4. 提交樣品過程中,請同時提供樣品的緩沖體系和樣品中蛋白的預估含量;
樣品運輸:
我們推薦您將樣品凍干后進行運輸,凍干樣品中蛋白非常穩定;
液體樣品推薦干冰運輸,短途運輸冰袋也可以;
注意:
利用質譜進行蛋白樣品的鑒定,在樣品準備過程中需佩戴手套和頭套,盡量避免自身角蛋白(keratin)對樣品的污染。
在技術報告中,百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告,報告包括:
1. 實驗步驟(中英文)
2. 相關的質譜參數(中英文)
3. 質譜圖片
4. 原始數據
5. 鑒定的蛋白質詳細信息
您只需下單-寄送樣品
百泰派克一站式服務完成:樣品處理-上機分析-數據分析-項目報告