標準的pull-down分析需要帶有重組親和標簽的純化蛋白，該標簽具有“誘餌”的功能，并固定在標簽特異性親和配體上。然后將另一種蛋白質或“獵物”蛋白質與“誘餌”蛋白質一起孵育。當這兩種蛋白質發生物理相互作用時，“獵物”蛋白質將被“誘餌”蛋白質捕獲。之后，取決于親和配體，可以使用洗脫緩沖液洗脫相互作用的“獵物”蛋白。最后，“獵物”和“誘餌”蛋白都可以通過十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）分離，然后對凝膠染色通過蛋白質印跡法進行檢測。

GST pull-down融合蛋白沉降技術，利用基因重組將帶有GST標簽的載體插入到目標蛋白A上，谷胱甘肽包裹的磁珠與目標融合蛋白結合，加入細胞裂解液后，具有相互作用的蛋白被融合蛋白吸附，加入過量的谷胱甘肽進行洗脫，洗脫后的樣品通過質譜分析法對樣品進行分析鑒定。GST pull-down融合蛋白沉降技術蛋白相互作用分析主要是研究體外強烈或者穩定的蛋白質間相互作用；可以鑒定兩種已知的感興趣蛋白質可能存在的直接相互作用；尋找可能與目標蛋白存在相互作用關系的未知蛋白。

除了確認蛋白質之間的相互作用外，GST pull-down融合蛋白沉降技術蛋白互作分析法還可用于表征蛋白相互作用的條件。例如，使用蛋白質結構域截短法進行pull-down法可以對蛋白質相互作用至關重要的功能區域進行確定。此外，GST pull-down融合蛋白沉降技術蛋白相互作用分析法還可用于探索目的蛋白質相互作用的伴侶，將“誘餌”蛋白與混合蛋白溶液或細胞/組織提取物一起孵育。洗滌步驟后，可以通過高通量方法洗脫并對結合的蛋白質進行質譜鑒定。

*百泰派克提供基于質譜的pull-down樣品蛋白質譜鑒定，詳情參見：基于質譜的互作蛋白質譜分析方法

Pull-down互作蛋白質分析流程

作為領先的組學技術服務公司，百泰派克生物科技在基于質譜的蛋白互作分析方面擁有多年經驗。百泰派克提供蛋白表達和純化的高效策略，以及用于pull-down蛋白互作分析的最優優化方案。我們以嚴格的質量控制和較短的檢測周期為特色，百泰派克生物科技為節省您的寶貴時間和預算，向客戶提供可定制的一站式服務，涵蓋您項目中從基因合成到數據報告的每個步驟：

• 基因合成，表達質粒構建-誘餌蛋白的表達，純化和固定化-獵物蛋白的表達和純化-孵育，洗滌和洗脫
• 通過SDS-PAGE, Western對蛋白相互作用進行鑒定
• LC-MS質譜鑒定相互作用蛋白-數據分析-出具中英文報告-免費咨詢

互作蛋白分析：
蛋白質CO-IP免疫共沉淀法技術服務

蛋白質譜鑒定/質譜分析：
蛋白膠點、膠條、IP、CO-IP、pull-down樣品蛋白質質譜鑒定服務

蛋白分離純化：
基于SDS-PAGE的蛋白分離服務