蛋白質一級結構是組成蛋白質多肽鏈的線性氨基酸序列。蛋白測序，蛋白序列分析，蛋白一級結構分析，蛋白氨基酸序列分析是確定蛋白質全部氨基酸序列的過程。通過蛋白質測序獲得的信息，有非常多有價值的用途，包括：1，用于蛋白質的鑒定；2，設計分子克隆的探針；3，合成可用作免疫原的肽段等。

蛋白測序服務常見有兩種主要的方法：Edman降解（Harvey和Ferrier，2011； Bauer等，1997）和質譜分析（MS）（Sahukar等，2016）。目前使用最廣的蛋白質測序和鑒定方法是質譜法，而Edman降解則是表征蛋白質N端最重要的方法之一。百泰派克生物科技使用nano LC-MS/MS納升色譜結合串聯質譜及島津公司Edman降解測序系統對蛋白質序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對蛋白質的氨基酸組成分析，N端測序，C端測序和全序列分析，以及基于Edman降解的蛋白質N端序列分析服務。對于未知理論序列的蛋白質，提供基于從頭測序法的蛋白質從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

質譜法用于蛋白質序列分析，較Edman降解法而言，其優點在于，質譜法更敏感，可以更快地裂解肽，可以識別末端封閉或修飾的蛋白質。百泰派克生物科技利用現有的高分辨率質譜技術平臺，提供以質譜為基礎的蛋白質序列分析服務，可實現對所測定靶蛋白序列100%的覆蓋。此分析可以用于確認重組蛋白是否得到完整表達，檢測重組蛋白表達過程是否發生斷裂等。

蛋白樣品序列分析過程一般只會使用Trypsin對蛋白進行酶切，鑒定到的肽段覆蓋率大概在60%。為了得到靶蛋白的全部序列信息，百泰派克生物科技會選用在蛋白序列分析過程中常用的6種蛋白酶（Trypsin、Chymotrypsin、Asp-N、Glu-C、Lys-C和Lys-N）分別對靶蛋白進行酶切和質譜測定，在得到碎裂肽段片段的同時，經過肽段之間的拼接完成蛋白序列100%的測定。百泰派克使用Thermo公司最新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀實現對蛋白樣品的序列分析，Obitrap Fusion Lumos質譜儀是現在分辨率和靈敏度最高的質譜儀，保證了低豐度肽段碎裂片段鑒定的靈敏度；同時在肽段碎裂過程中采取HCD與ETD結合的模式，保證肽段碎裂片段的完整性。可以實現蛋白樣品的N端，C端序列分析以及蛋白全長序列分析。

蛋白質測序示意圖

Edman降解測序法是能夠獲得蛋白質N端氨基酸序列信息的化學方法，由Pehr Edman在1950年代初期開發的。該方法可在不干擾肽鍵的情況下標記并對N末端的氨基酸序列進行分析（Hunkapiller，1988； Liu等人，2016）。

Edman降解法在蛋白質樣品N端序列分析中得到了廣泛應用。但是在實際應用中，Edman降解法也有一定的局限。例如N末端封閉或有化學修飾的情況下將不能使用Edman降解法對蛋白質序列進行分析。這時就可以借助先進的nano LC-MS/MS納升色譜結合串聯質譜平臺對N端序列進行質譜測序，質譜平臺可以實現末端封閉和修飾的蛋白質的序列分析，與Edman降解法形成互補，保證N端測序服務的順利進行。百泰派克生物科技采用島津公司Edman測序系統，為廣大科研工作者和科研客戶提供純化后蛋白產物、蛋白疫苗以及各類蛋白樣品的N端測序服務。采用我們的測序系統，可以測定N端多達30個氨基酸的序列信息。

有許多可以進行樣品制備的方法，沒有特定的方法是效果最好的樣品制備方式。每個樣品方式都有各自的優點和缺點。制備特定樣品的最佳方法可結合實驗室的經驗及常用方法，并參考您自己關于產率、純度、成本和速度的要求。最常用于制備蛋白質測序樣品的方法包括：
1. 十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）
2. 高效液相色譜（HPLC）
3. 毛細管電泳（CE）

*選擇樣品制備方法時需要考慮的因素包括：1）實驗周期要求；2）樣品的純度要求；3）所需蛋白的質量。如果您暫時不具備樣品制備的條件，百泰派克生物科技一站式蛋白分析服務提供樣品制備服務，歡迎來電咨詢。

百泰派克生物科技一站式蛋白測序服務可對來自PVDF膜、膠點、膠條、溶液等狀態下的樣品進行蛋白質序列分析。樣品運輸是大家比較常見的問題，切下的蛋白條帶進行密閉包裝，使用冰袋運輸即可；溶液樣品，可進行真空抽干或冷凍抽干后，使用冰袋運輸，也可通過干冰對樣品進行運輸。歡迎來電咨詢。