產品簡介:
Ø β-半乳糖苷酶是一種常用的報告基因分子,通過原位染色,在普通的光學顯微鏡下就可以用于檢測到β-半乳糖苷酶的表達。
本試劑盒可以用于組織切片的染色也可以用于培養細胞的染色。
Ø 碧云天生產的β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒,是以X-Gal為底物,在β-半乳糖苷酶的催化下會生成深藍色的產物。從而在光學顯微鏡下很容易觀察到變成藍色的表達β-半乳糖苷酶的細胞或組織。
Ø 如果使用6孔板檢測,足夠測定100個樣品;使用24孔板測定,足夠測定400個樣品;使用96孔板測定足夠測定1000個樣品。對于組織切片或組織塊,可以檢測的樣品的數量視樣品的大小而定。對于普通的切片也至少足夠檢測100個樣品。
相關產品:
β-半乳糖苷酶報告基因檢測試劑盒,熒光素酶報告基因檢測試劑盒。
包裝清單:
β-半乳糖苷酶染色固定液 100 ml
X-Gal溶液 5ml
β-半乳糖苷酶染色溶液A 1ml
β-半乳糖苷酶染色溶液B 1ml
β-半乳糖苷酶染色溶液C 100ml
說明書 一份
保存條件:
β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒,所有試劑均需-20℃保存,一年有效。
注意事項:
Ø β-半乳糖苷酶染色固定液有一定的腐蝕性和毒性,操作時請注意防護。
Ø 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
對于培養細胞樣品:
1. 轉染細胞:采取適當的方法將表達β-半乳糖苷酶的質粒轉染細胞。轉染細胞24-48小時后可以使用本試劑盒進行原位染色,檢測β-半乳糖苷酶的表達。
2. 對于六孔板,吸凈細胞培養液,加入1毫升β-半乳糖苷酶染色固定液,室溫固定10分鐘。對于其它類型的培養板,固定液及后續溶液的用量參照此比例進行操作。
3. 吸凈細胞固定液,用PBS洗滌細胞三次,每次3分鐘。
4. 吸凈PBS,每孔加入1毫升染色液。使用聚丙烯(polypropylene)容器,不能使用聚苯乙烯(polystyrene)容器配制染色液。
染色液的配制如下:
β-半乳糖苷酶染色溶液A 10微升
β-半乳糖苷酶染色溶液B 10微升
β-半乳糖苷酶染色溶液C 930微升 X-Gal溶液 50微升
5. 37℃孵育20分鐘至2小時,或更長時間,直至部分細胞的顏色變藍。如果孵育時間較長,可以用parafilm或保鮮膜封住6孔板防止蒸發。
6. 普通光學顯微鏡下觀察。如不能及時觀察,可以去除染色液,加入2毫升PBS,在4℃可以保存數天。
對于組織切片或非常小的組織塊:
1. 對于組織切片或非常小的組織塊,加入適當體積的β-半乳糖苷酶染色固定液,以充分蓋住組織為宜,室溫固定不少于10分鐘。
對于小的組織塊,固定時間應該適當延長。
2. 用PBS洗滌組織三次,每次不少于5分鐘。對于組織塊,時間還要適當延長。
3. 吸凈PBS,每孔加入1毫升染色液。染色液的配制參照上面對于培養細胞樣品的第4步。
4. 吸凈細胞固定液,用PBS洗滌組織三次,每次不少于5分鐘。對于組織塊,時間還要相應延長。
5. 37℃孵育20分鐘至2小時,或更長時間,直至部分細胞的顏色變藍。如果孵育時間較長,可以用parafilm或保鮮膜封住放置組織的容器,以放置蒸發。
6. 普通光學顯微鏡下觀察。如不能及時觀察,可以去除染色液,加入2毫升PBS,在4℃可以保存數天。
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碧云天由在哈佛大學工作和學習的留學人員創辦于2001年。20余年來專注于自主研發和生產。2007年成立上海碧云天生物技術有限公司,為國家級專精特新“小巨人”企業,并進一步入選第二批第一年建議支持的國家級專精特新“小巨人”企業,也是上海市科技小巨人企業、G60科創走廊一類重點扶持企業、上海市高新技術企業和上海市專精特新中小企業。江蘇碧云天為江蘇省高新技術企業,南通市雙創優企。公司主要研發生產生物、醫學研究用試劑、試劑盒、消耗品和儀器設備,同時提供生命科學研究的技術服務和一站式實驗儀器設備采購平臺。公司核心團隊由來自美國哈佛大學、NIH、香港大學、中國科學院等國內外著名大學和科研機構的高水平科研人員及諾華、默克等頂尖醫藥企業的管理人員組成。2016年1人獲國務院政府特殊津貼,2人入選“松江區優秀人才”;2019年1人入選國家百千萬人才工程,1人入選上海市領軍人才,6人獲G60科創走廊優秀人才獎勵,3人入選長三角G60科創走廊科技精英,3人入選上海市松江區拔尖人才培養計劃。2019年碧云天榮獲江蘇省雙創人才創業類第一名,2020年碧云天團隊榮獲江蘇省雙創團隊創業類最高資助。2020年1人榮獲上海市五四青年獎章,多人獲G60科創走廊優秀人才獎勵。2021年2人次入選國家級領軍人才,2022年1人次入選國家級創新人才。截止2022年12月,已有累計超過150000篇注明使用碧云天產品的研究論文發表在包括Cell、Nature、Science等國際高水平學術期刊。Beyotime品牌年度文獻引用率國內領先,并躋身全球20強。碧云天將繼續致力于科研用技術和產品的研發,用我們最頂尖的技術、最成熟的產品、最熱情的服務,服務生命科學,造福人民健康!