產品簡介：

Ø 碧云天2005年底最新推出的DNA凝膠回收試劑盒(DNA Gel Extraction Kit)，是世界上最先進的DNA凝膠回收試劑盒之一。本
產品采用了融膠液，可以使瓊脂糖凝膠完全融化。同時采用了一種新型的離子交換柱，在特定條件下，使DNA能在離心過柱的瞬
間，結合到DNA純化柱上，在一定條件下又能將DNA充分洗脫，從而實現DNA的快速純化。無需酚氯仿抽提，無需酒精沉淀，通常
12個樣品只需不足20分鐘即可完成。

Ø DNA純化柱的容量約為15微克。

Ø 適用于PCR反應后去除引物，酶，礦物油，甘油，鹽等雜質；也同樣適用于酶切，連接，磷酸化，補平或切平，隨機引物等反應

后的DNA純化。所得的DNA可直接用于酶切，連接，轉化細菌，測序，PCR，雜交等后續操作。本試劑盒適用于純化100bp-10kb
DNA。長至30個堿基的引物均可被完全去除。
Ø DNA回收效率通常為60-90%。接近100bp或10kb的DNA片斷回收效率要略低一些，大于10kb的DNA回收效率迅速下降。另外如果
樣品中DNA含量特別低也會導致回收效率下降。

Ø 每個試劑盒足夠用于50個平均重量不超過400微克的凝膠樣品。


包裝清單：

產品編號 產品名稱 包裝
D0056-1 溶液I (融膠液) 20 ml
D0056-2 溶液II (洗滌液) 26ml (第一次使用前加入39ml無水乙醇)
D0056-3 溶液III (洗脫液) 3 ml
— DNA純化柱 50個
— 廢液收集管 50個
— 說明書 1份




保存條件：

室溫保存，一年有效。



注意事項：

Ø 第一次使用前在溶液II (洗滌液)中加入39ml無水乙醇，混勻，并在瓶上做好標記。
Ø 溶液I對人體有刺激性，操作時請小心，并注意適當防護。
Ø 本試劑盒所有操作均在室溫進行，操作時無需冰浴。所有離心也均在室溫進行。

Ø 廢液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丟棄。

Ø 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。



使用說明：

1. 切膠回收后，稱重，將膠切碎或在離心管內用1ml槍頭搗碎。

2. 加入等體積的溶液I（如膠為100mg，則加100微升溶液I），vortex或顛倒混勻。
3. 50-60℃水浴加熱約10分鐘至膠全融，期間，需vortex或顛倒混勻3-4次，以加速凝膠融解。
果膠碎片較小，3-5分鐘即可全融，凝膠碎片較大則需較長時間，膠全融后至少再在50-60℃水浴加熱2分鐘。50-60℃間任一溫
度都適合于本試劑盒。如果DNA片斷大于5kb，宜顛倒混勻。Vortex容易導致大片斷DNA斷裂。
4. 加入到DNA純化柱內，室溫放置1分鐘。
如果體積較大，DNA純化柱內容納不下，可以把部分樣品加入到純化柱內，經離心處理后，再加入剩余的樣品繼續處理。
5. 最高速(16000g，約12000-14000rmp左右)離心1分鐘，倒棄收集管內的液體。
注意：這一步一定要達到16000g，較低離心速度會導致回收效率下降。
6. 在DNA純化柱內加入700微升溶液II，室溫放置1分鐘。
7. 最高速離心1分鐘，洗去雜質。倒棄收集管內的液體。
8. 再加入500微升溶液II，最高速離心1分鐘，進一步洗去雜質。倒棄收集管內的液體。
9. 最高速再離心1分鐘，除去殘留液體并讓殘留的乙醇充分揮發。
10. 將DNA純化柱置于1.5毫升離心管上，加入30微升溶液III至管內柱面上，放置1分鐘。
用1.5ml離心管作為收集管。溶液III需要直接加至管內柱面中央，使液體被純化柱吸收。如果不慎將溶液III沾在管壁上，一定
要震動管子，使液體滑落到管底，以便被純化柱吸收。也可以用重蒸水或MiliQ級純水替代溶液III，但是水的pH應不小于6.5。
如需得到較高濃度的DNA，可以只加20微升溶液III，但產量會略有下降。放置較長時間例如3-5分鐘，會對提供產量略有幫助。
11. 最高速離心1分鐘，所得液體即為高純度DNA。


使用碧云天DNA凝膠回收試劑盒的文獻：
1. Wen-guang Zhou, Yu-tuo Wei, Kun Huang and Ri-bo Huang.
Cloning and expression of glycerol dehydratase gene from Klebsiella pneumoniae in Escherichia coli.
Indust Microbiol. 2004, 34(2): 1-4.