產品簡介:
Ø 碧云天生產的 Beyozol-總RNA抽提試劑是目前世界上最先進的總RNA抽提試劑之一。本產品采用和 Trizol完全相似的原理和方法,可以采用和Trizol完全相同的方法進行操作,但價格有Trizol的30%!
Ø Beyozol對動植物細胞或組織及細菌的總RNA抽提均適用。
Ø Beyozol抽提所得RNA無DNA和蛋白污染。一般所得RNA溶于DEPC水后的A260/280值為1.6-1.8。
Ø 每一百萬細胞用Beyozol抽提可得5-15微克RNA;每毫克組織用Beyozol抽提可得1-10微克RNA。產量因細胞和組織不同而異。
Ø 抽提兩個樣品約需一小時。
Ø Beyozol抽提所得RNA可直接用于Northern,點雜交,純化mRNA,體外翻譯,RNase protection assay, cDNA克隆,以及RT- PCR。
Ø 每100ml Beyozol可以抽提100個六孔板中的樣品或100個50-80mg的組織樣品。
包裝清單:
Beyozol 100 ml
說明書 1 份
保存條件:
4℃保存,本試劑自訂購之日起一年內有效。
注意事項:
Ø 所有離心管,槍頭及相關溶液都必需無 RNA酶污染。耐高溫器物可 150烘烤4小時以除去 RNA酶,其它器物除RNA酶可考慮蒸水用0.01%的DEPC水浸泡過夜,然后滅菌,烘干。溶液需用 DEPC水配制。加0.01%(體積比) diethylpyrocarbonate(DEPC)至重或MiliQ級水中,處理過夜,滅菌即成DEPC水。
Ø 必需戴一次性手套操作,且盡量不要對著RNA樣品呼氣或說話,以防RNA酶污染。
Ø Beyozol含有毒物質苯酚,避免接觸皮膚或吸入。為防止濺入眼睛,請戴防護眼鏡或使用透明保護屏。如皮膚接觸 Beyozol,請立即用大量去垢劑和水沖洗,如仍有不適,請聽取醫生意見。
Ø 需自備氯仿,異丙醇,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。
Ø Beyozol抽提總RNA的同時,理論上也可抽提蛋白和DNA,但尚未經測試。有興趣者可按Trizol的操作步驟進行操作。
使用說明:
1. 細胞裂解或組織勻漿。
a. 貼壁細胞
吸盡培養液,每 10平方厘米細胞加入1ml Beyozol。一般六孔板每孔加1ml,12孔板每孔加 0.5ml。晃動3-5下,再用槍吹打2-3下,確保全部裂解,然后吸至離心管中。
b. 懸浮細胞
離心收集細胞,吸盡液體,每五百萬至一千萬動植物或酵母細胞,或一千萬細菌,加入1mlBeyozol。用槍吹打或適當vortex 確保全部裂解。某些酵母和細菌如裂解不充分,可用勻漿器勻漿,確保全部裂解。
c. 組織
先將組織剪切成小塊,放入普通玻璃勻漿器內。每50mg-80mg組織加入1ml Beyozol,勻漿。
2. 對于某些蛋白,多糖或脂含量很高的細胞或組織,Beyozol 裂解后可能會有不溶物或油脂狀漂浮物。需12,000×g 4℃ 離心10分鐘,然后吸取澄清的Beyozol裂解產物至一新的離心管中。
3. 室溫放置5分鐘,使樣品充分裂解。
4. 每毫升Beyozol加入0.2ml氯仿,vortex混勻或猛烈晃動15秒,室溫放置2-3分鐘。
5. 12,000×g 4℃離心15分鐘,然后吸取含總RNA的上層水相至一新的離心管中,每毫升Beyozol約可吸取0.5-0.55ml。
6. 按每毫升最初的Beyozol加入0.5ml異丙醇,顛倒數次混勻,室溫沉淀10分鐘。
7. 12,000×g 4℃離心10分鐘,在管底可見膠狀RNA沉淀,棄上清。
8. 每毫升最初的Beyozol加入1ml75%乙醇,vortex或顛倒混勻,
9. 7,500×g 4℃離心5分鐘,棄上清。再用離心機甩一下(>5,000rpm, 離心1秒),小心吸盡液體。
10. 待RNA略干后,加入20微升DEPC水溶解,-70℃凍存。注意,切勿讓RNA過分干燥,否則將極難溶解,且測出的A260/280值會 低于1.6。
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碧云天由在哈佛大學工作和學習的留學人員創辦于2001年。20余年來專注于自主研發和生產。2007年成立上海碧云天生物技術有限公司,為國家級專精特新“小巨人”企業,并進一步入選第二批第一年建議支持的國家級專精特新“小巨人”企業,也是上海市科技小巨人企業、G60科創走廊一類重點扶持企業、上海市高新技術企業和上海市專精特新中小企業。江蘇碧云天為江蘇省高新技術企業,南通市雙創優企。公司主要研發生產生物、醫學研究用試劑、試劑盒、消耗品和儀器設備,同時提供生命科學研究的技術服務和一站式實驗儀器設備采購平臺。公司核心團隊由來自美國哈佛大學、NIH、香港大學、中國科學院等國內外著名大學和科研機構的高水平科研人員及諾華、默克等頂尖醫藥企業的管理人員組成。2016年1人獲國務院政府特殊津貼,2人入選“松江區優秀人才”;2019年1人入選國家百千萬人才工程,1人入選上海市領軍人才,6人獲G60科創走廊優秀人才獎勵,3人入選長三角G60科創走廊科技精英,3人入選上海市松江區拔尖人才培養計劃。2019年碧云天榮獲江蘇省雙創人才創業類第一名,2020年碧云天團隊榮獲江蘇省雙創團隊創業類最高資助。2020年1人榮獲上海市五四青年獎章,多人獲G60科創走廊優秀人才獎勵。2021年2人次入選國家級領軍人才,2022年1人次入選國家級創新人才。截止2022年12月,已有累計超過150000篇注明使用碧云天產品的研究論文發表在包括Cell、Nature、Science等國際高水平學術期刊。Beyotime品牌年度文獻引用率國內領先,并躋身全球20強。碧云天將繼續致力于科研用技術和產品的研發,用我們最頂尖的技術、最成熟的產品、最熱情的服務,服務生命科學,造福人民健康!