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Beyozol,總RNA抽提試劑
英文名稱:總訪問:3355
國產/進口:國產半年訪問:63
產地/品牌:碧云天生物技術研究所產品類別:分子生物學試劑
規       格:R0011(100毫升) 最后更新:2018-4-26
貨       號:
CAS   號:
參考報價:398.00元
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  • 產品介紹
  • 公司簡介

產品簡介:
Ø 碧云天生產的 Beyozol-總RNA抽提試劑是目前世界上最先進的總RNA抽提試劑之一。本產品采用和 Trizol完全相似的原理和方法,可以采用和Trizol完全相同的方法進行操作,但價格有Trizol的30%!
Ø Beyozol對動植物細胞或組織及細菌的總RNA抽提均適用。
Ø Beyozol抽提所得RNA無DNA和蛋白污染。一般所得RNA溶于DEPC水后的A260/280值為1.6-1.8。
Ø 每一百萬細胞用Beyozol抽提可得5-15微克RNA;每毫克組織用Beyozol抽提可得1-10微克RNA。產量因細胞和組織不同而異。
Ø 抽提兩個樣品約需一小時。
Ø Beyozol抽提所得RNA可直接用于Northern,點雜交,純化mRNA,體外翻譯,RNase protection assay, cDNA克隆,以及RT- PCR。
Ø 每100ml Beyozol可以抽提100個六孔板中的樣品或100個50-80mg的組織樣品。

包裝清單:
Beyozol 100 ml
說明書 1 份

保存條件:
4℃保存,本試劑自訂購之日起一年內有效。

注意事項:
Ø 所有離心管,槍頭及相關溶液都必需無 RNA酶污染。耐高溫器物可 150烘烤4小時以除去 RNA酶,其它器物除RNA酶可考慮蒸水用0.01%的DEPC水浸泡過夜,然后滅菌,烘干。溶液需用 DEPC水配制。加0.01%(體積比) diethylpyrocarbonate(DEPC)至重或MiliQ級水中,處理過夜,滅菌即成DEPC水。
Ø 必需戴一次性手套操作,且盡量不要對著RNA樣品呼氣或說話,以防RNA酶污染。
Ø Beyozol含有毒物質苯酚,避免接觸皮膚或吸入。為防止濺入眼睛,請戴防護眼鏡或使用透明保護屏。如皮膚接觸 Beyozol,請立即用大量去垢劑和水沖洗,如仍有不適,請聽取醫生意見。
Ø 需自備氯仿,異丙醇,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。
Ø Beyozol抽提總RNA的同時,理論上也可抽提蛋白和DNA,但尚未經測試。有興趣者可按Trizol的操作步驟進行操作。

使用說明:
1. 細胞裂解或組織勻漿。
a. 貼壁細胞
吸盡培養液,每 10平方厘米細胞加入1ml Beyozol。一般六孔板每孔加1ml,12孔板每孔加 0.5ml。晃動3-5下,再用槍吹打2-3下,確保全部裂解,然后吸至離心管中。
b. 懸浮細胞
離心收集細胞,吸盡液體,每五百萬至一千萬動植物或酵母細胞,或一千萬細菌,加入1mlBeyozol。用槍吹打或適當vortex 確保全部裂解。某些酵母和細菌如裂解不充分,可用勻漿器勻漿,確保全部裂解。
c. 組織
先將組織剪切成小塊,放入普通玻璃勻漿器內。每50mg-80mg組織加入1ml Beyozol,勻漿。
2. 對于某些蛋白,多糖或脂含量很高的細胞或組織,Beyozol 裂解后可能會有不溶物或油脂狀漂浮物。需12,000×g 4℃ 離心10分鐘,然后吸取澄清的Beyozol裂解產物至一新的離心管中。
3. 室溫放置5分鐘,使樣品充分裂解。
4. 每毫升Beyozol加入0.2ml氯仿,vortex混勻或猛烈晃動15秒,室溫放置2-3分鐘。
5. 12,000×g 4℃離心15分鐘,然后吸取含總RNA的上層水相至一新的離心管中,每毫升Beyozol約可吸取0.5-0.55ml。
6. 按每毫升最初的Beyozol加入0.5ml異丙醇,顛倒數次混勻,室溫沉淀10分鐘。
7. 12,000×g 4℃離心10分鐘,在管底可見膠狀RNA沉淀,棄上清。
8. 每毫升最初的Beyozol加入1ml75%乙醇,vortex或顛倒混勻,
9. 7,500×g 4℃離心5分鐘,棄上清。再用離心機甩一下(>5,000rpm, 離心1秒),小心吸盡液體。
10. 待RNA略干后,加入20微升DEPC水溶解,-70℃凍存。注意,切勿讓RNA過分干燥,否則將極難溶解,且測出的A260/280值會 低于1.6。

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