產(chǎn)品簡介：
Ø Western及IP細(xì)胞裂解液（cell lysis buffer for Western & IP)，是一種在非變性條件下裂解細(xì)胞的裂解液。本細(xì)胞裂解液裂解的細(xì)胞，可以用于PAGE，Western，免疫沉淀（immnol precipitation，IP）和免疫共沉淀（co-IP）。
Ø Western及IP細(xì)胞裂解液的主要成分為20mM Tris (pH 7.5)，150mM NaCl，1% Triton X-100，以及EDTA，EGTA，sodium pyrophossphate，β-glycerophosphate，Na3VO4，leupeptin等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白的降解，并維持原有的蛋白間相互作用。
Ø Western及IP細(xì)胞裂解液不僅可以用于培養(yǎng)細(xì)胞的裂解，也可以直接用于大多數(shù)組織的裂解。

包裝清單：
Western及IP細(xì)胞裂解液 100ml
說明書 1 份

保存條件：
-20℃保存，一年有效。

注意事項：
Ø 為取得最佳的使用效果，盡量避免過多的反復(fù)凍融�？梢赃m當(dāng)分裝后使用。
Ø 需自備PMSF。
Ø 裂解蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進(jìn)行。
Ø 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用說明：
對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：
1. 融解Western及IP細(xì)胞裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF至最終濃度為1mM。
2. 如果是貼壁細(xì)胞，按照6孔板每孔加入100微升裂解液的比例（即細(xì)胞培養(yǎng)液量的1/20）加入裂解液。如果是懸浮細(xì)胞，離心收集細(xì)胞后，也按照6孔板每孔加入100微升裂解液的比例（即細(xì)胞培養(yǎng)液量的1/20）加入裂解液。
3. 充分裂解后，10000-14000rpm離心3-5分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

對于組織樣品：
1. 把組織剪切成細(xì)小的碎片。
2. 融解Western及IP細(xì)胞裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF至最終濃度為1mM。
3. 按照每約每20毫克組織加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。（如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量。）
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000rpm離心3-5分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過強(qiáng)烈vortex使裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。