產品簡介：

Ø 神經氨酸酶檢測試劑盒(Neuraminidase Assay Kit)是一個用熒光法快速高靈敏度檢測神經氨酸酶酶活性的試劑盒。

Ø 本試劑盒可以檢測來源于不同生物的神經氨酸酶的酶活力，包括禽流感病毒的神經氨酸酶的酶活力。

Ø 試劑盒中提供了純化的神經氨酸酶作為陽性對照，便于檢測體系的建立。

Ø 試劑盒中提供了可以被神經氨酸酶催化產生熒光的底物，該底物被神經氨酸酶催化后可以產生較強的熒光，從而實現了對神經氨

酸酶的快速高靈敏檢測。
Ø 一個包裝的本試劑盒可以檢測100個樣品或標準品。




包裝清單：

產品編號 產品名稱 包裝
P0306-1 神經氨酸酶檢測緩沖液 10ml
P0306-2 神經氨酸酶 50微升
P0306-3 神經氨酸酶熒光底物 1ml
P0306-4 Milli-Q水 1.2ml
— 說明書 1 份




保存條件：

-20℃保存，半年有效。




注意事項：

Ø 相同體積的情況下，樣品中神經氨酸酶的酶活力不宜高過試劑盒中所提供的標準品的酶活力。單位體積內酶活力過高會導致熒光

底物相對不足，使測定出來的酶活力低于實際的酶活力。如果樣品中酶活力過高，可以適當稀釋后再進行測定。
Ø 神經氨酸酶和神經氨酸酶熒光底物盡量避免反復凍融。

Ø 試劑盒中所用溶液溶解后4℃保存，兩天有效。如果兩天內不能全部用完，建議盡早把留作以后使用的神經氨酸酶和神經氨酸酶

熒光底物適當分裝后-70℃保存，-20℃凍存也可，但有效期會較短。其余試劑直接-20℃或-70℃保存即可。
Ø 需使用熒光酶標儀，并需自備專門用于熒光酶標儀熒光檢測的96孔熒光酶標板。或使用可以檢測小體積樣品的熒光分光光度計。


使用熒光分光光度計時參考熒光酶標板的操作方法。
Ø 由于熒光檢測非常靈敏，測定出來的熒光強度有時容易產生波動。一方面要避免灰塵等掉入檢測孔中產生熒光干擾，另一方面所


有檢測最好在同一塊檢測板上做雙份平行檢測甚至三份平行檢測。
Ø 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。


使用說明：

1. 陽性和陰性對照檢測的準備(參考表1)：

a.
在96孔熒光酶標板內每孔加入70微升神經氨酸酶檢測緩沖液。


b. 每孔再分別加入10或0微升神經氨酸酶。

c. 每孔再加入10微升溶解神經氨酸酶的溶液。例如神經氨酸酶在RIPA溶液中，則加10微升RIPA溶液。

d. 每孔再加入0或10微升Milli-Q水使每孔總體積為90微升。

2. 樣品檢測的準備(參考表1)：

a. 在96孔熒光酶標板內每孔加入70微升神經氨酸酶檢測緩沖液。

b. 每孔再加入10微升神經氨酸酶樣品。

c. 每孔再加入10微升Milli-Q水使每孔總體積為90微升。

3. 檢測(參考表1)：
a. 振動混勻約1分鐘。

b. 每孔加入10微升神經氨酸酶熒光底物。

c. 再振動混勻約1分鐘。

d. 37℃孵育20分鐘后進行熒光測定。激發波長為360nm，發射波長為440nm。

如果所用的熒光酶標儀的靈敏度較高，37℃孵育10分鐘后即可進行熒光測定。如果所用的熒光酶標儀的靈敏度較低，可以在孵育

30分鐘或60分鐘后進行熒光測定。由于反應是連續進行的，可以在不同時間點進行測定，以確定適合您的檢測體系的最佳孵育時
間。
表1

陽性對照 陰性對照 樣品
神經氨酸酶檢測緩沖液 70微升 70微升 70微升
神經氨酸酶(陽性對照) 10微升 － －
溶解神經氨酸酶樣品的溶液 10微升 10微升 －
神經氨酸酶樣品 － － 10微升
Milli-Q水 － 10微升 10微升
神經氨酸酶熒光底物 10微升 10微升 10微升
總體積 100微升 100微升 100微升

4. 計算：
根據檢測出來的熒光強度可以計算出樣品間神經氨酸酶的相對活力。