產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
Ø 細(xì)胞凋亡－Hoechst染色試劑盒(Apoptosis, Hoechst Staining Kit)為您提供了一種快速簡(jiǎn)便的細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法。細(xì)胞發(fā)
生凋亡時(shí)，染色質(zhì)會(huì)固縮。所以Hoechst染色時(shí)，細(xì)胞核會(huì)呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染，參見本頁照片（貼壁細(xì)胞）。
Ø 只需25分鐘即可完成細(xì)胞凋亡檢測(cè)。
Ø 本試劑盒提供了固定液，染色液，及抗熒光淬滅封片液。
Ø 對(duì)貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞和組織切片均適用。
Ø 足夠檢測(cè)100個(gè)樣品。
包裝清單：
固定液 50 ml
Hoechst 33258染色液 50 ml
抗熒光淬滅封片液 5 ml
說明書 1 份
保存條件：
4℃保存，Hoechst 33258染色液需4℃避光保存。本試劑盒自訂購(gòu)之日起六個(gè)月內(nèi)有效。
注意事項(xiàng)：
Ø 需可以觀察藍(lán)色熒光的熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡。
Ø 需PBS或0.9%NaCl溶液。
Ø 需蓋玻片與載玻片。蓋玻片與載玻片可以向碧云天訂購(gòu)。
Ø 熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，染色后的樣品宜避光保存�？梢韵虮淘铺爝x購(gòu)各種型號(hào)的載玻片存儲(chǔ)盒。
Ø 在使用抗淬滅封片液的情況下可以減緩淬滅，但仍宜盡量避光。
Ø 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1. 貼壁細(xì)胞
A. 取普通潔凈蓋玻片于70%乙醇中浸泡5分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間，無菌超凈臺(tái)內(nèi)吹干或用細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)PBS或0.9%NaCl等溶液洗滌三遍，再
用細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌一遍。將蓋玻片置于六孔板內(nèi)，種入細(xì)胞培養(yǎng)過夜，使約為50%-80%滿。
B. 刺激細(xì)胞發(fā)生凋亡后，吸盡培養(yǎng)液，加入0.5ml固定液，固定10分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間（可4℃過夜）。
C. 去固定液，用PBS或0.9%NaCl洗兩遍，每次3分鐘，吸盡液體。洗滌時(shí)宜用搖床，或手動(dòng)晃動(dòng)數(shù)次。
D. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分鐘。也宜用搖床，或手動(dòng)晃動(dòng)數(shù)次。
E. 用PBS或0.9%NaCl洗兩遍，每次3分鐘。
F. 滴一滴抗熒光淬滅封片液于載玻片上，蓋上貼有細(xì)胞的蓋玻片，盡量避免氣泡。使細(xì)胞接觸封片液，切勿弄反。
G. 熒光顯微鏡可檢測(cè)到呈藍(lán)色的細(xì)胞核。激發(fā)波長(zhǎng)在350nm左右，發(fā)射波長(zhǎng)在460nm左右，詳細(xì)圖譜請(qǐng)參考下圖。
2. 懸浮細(xì)胞
A. 離心收集細(xì)胞樣品于1.5ml離心管內(nèi)，加入0.5ml固定液，緩緩懸起細(xì)胞，固定10分鐘或更長(zhǎng)時(shí)間（可4℃過夜）。
B. 離心去固定液，用PBS或0.9%NaCl洗兩遍，每次3分鐘。洗滌期間手動(dòng)晃動(dòng)。
C. 最后一次離心后吸去大部分液體保留約50ml液體，再緩緩懸起細(xì)胞，滴加至載玻片上，盡量使細(xì)胞分布均勻。
D. 稍晾干，使細(xì)胞貼在載玻片上不易隨液體流動(dòng)。
E. 均勻滴上0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分鐘。用吸水紙從邊緣吸去液體，微晾干。
F. 用PBS或0.9%NaCl洗兩遍，每次3分鐘。
G. 滴一滴抗熒光淬滅封片液于載玻片上，蓋上一潔凈的蓋玻片，盡量避免氣泡。
H. 熒光顯微鏡可檢測(cè)到呈藍(lán)色的細(xì)胞核。激發(fā)波長(zhǎng)在350nm左右，發(fā)射波長(zhǎng)在460nm左右，詳細(xì)圖譜請(qǐng)參考下圖。
3. 組織切片
A. 對(duì)于任何常見切片，處理至常規(guī)可以進(jìn)行免疫染色時(shí)，或完成常規(guī)的免疫染色后，即可進(jìn)行后續(xù)的Hoechst染色。
B. PBS或0.9%NaCl洗兩遍，每次3分鐘，吸盡液體。洗滌時(shí)宜用搖床，或手動(dòng)晃動(dòng)數(shù)次�？稍诹装逯胁僮鳌�
C. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分鐘。也宜用搖床，或手動(dòng)晃動(dòng)。
D. 用PBS或0.9%NaCl洗兩遍，每次3分鐘。
E. 將切片置于載玻片上，滴一滴抗淬滅封片液，蓋上一潔凈的蓋玻片，盡量避免氣泡。
F. 熒光顯微鏡可檢測(cè)到呈藍(lán)色的細(xì)胞核。激發(fā)波長(zhǎng)在350nm左右，發(fā)射波長(zhǎng)在460nm左右，詳細(xì)圖譜請(qǐng)參考下圖。
Hoechst 33258的吸收光譜和發(fā)射光譜，左側(cè)峰為吸收光譜，右側(cè)峰為發(fā)射光譜。
使用本產(chǎn)品的文獻(xiàn)：
1. Li-Xin Zhu, Jing Liu, You-Hua Xie, Yu-Ying Kong, Ye Ye, Chun-Lin Wang, Guang-Di Li, Yuan Wang.
Expression of hepatitis C virus envelope protein 2 induces apoptosis in cultured mammalian cells.
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注：本文由中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院生化細(xì)胞所汪垣教授實(shí)驗(yàn)室發(fā)表，汪垣教授1986年與1992年兩次獲中國(guó)科學(xué)院科技進(jìn)步一等獎(jiǎng)，1989年獲國(guó)家自然科學(xué)二等獎(jiǎng)，1992年獲北京國(guó)際發(fā)明展金獎(jiǎng)，世界知識(shí)產(chǎn)權(quán)組織授予的婦女發(fā)明金獎(jiǎng)，1993年獲上海市第二屆科技博覽會(huì)金獎(jiǎng)，1993年獲國(guó)家科技進(jìn)步一等獎(jiǎng)。1993年獲上海市科技進(jìn)步一等獎(jiǎng)。1994年獲上海市科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)。1995年獲上海市科技進(jìn)步獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)。2001年獲中國(guó)科學(xué)院首屆十大女杰稱號(hào)。2002年被授予首屆“新世紀(jì)巾幗發(fā)明家”。1996年被評(píng)為中國(guó)科學(xué)院優(yōu)秀研究生導(dǎo)師。2001年獲中科院“寶潔”優(yōu)秀研究生導(dǎo)師獎(jiǎng)。
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碧云天由在哈佛大學(xué)工作和學(xué)習(xí)的留學(xué)人員創(chuàng)辦于2001年。20余年來專注于自主研發(fā)和生產(chǎn)。2007年成立上海碧云天生物技術(shù)有限公司，為國(guó)家級(jí)專精特新“小巨人”企業(yè)，并進(jìn)一步入選第二批第一年建議支持的國(guó)家級(jí)專精特新“小巨人”企業(yè)，也是上海市科技小巨人企業(yè)、G60科創(chuàng)走廊一類重點(diǎn)扶持企業(yè)、上海市高新技術(shù)企業(yè)和上海市專精特新中小企業(yè)。江蘇碧云天為江蘇省高新技術(shù)企業(yè)，南通市雙創(chuàng)優(yōu)企。公司主要研發(fā)生產(chǎn)生物、醫(yī)學(xué)研究用試劑、試劑盒、消耗品和儀器設(shè)備，同時(shí)提供生命科學(xué)研究的技術(shù)服務(wù)和一站式實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備采購(gòu)平臺(tái)。公司核心團(tuán)隊(duì)由來自美國(guó)哈佛大學(xué)、NIH、香港大學(xué)、中國(guó)科學(xué)院等國(guó)內(nèi)外著名大學(xué)和科研機(jī)構(gòu)的高水平科研人員及諾華、默克等頂尖醫(yī)藥企業(yè)的管理人員組成。2016年1人獲國(guó)務(wù)院政府特殊津貼，2人入選“松江區(qū)優(yōu)秀人才”；2019年1人入選國(guó)家百千萬人才工程，1人入選上海市領(lǐng)軍人才，6人獲G60科創(chuàng)走廊優(yōu)秀人才獎(jiǎng)勵(lì)，3人入選長(zhǎng)三角G60科創(chuàng)走廊科技精英，3人入選上海市松江區(qū)拔尖人才培養(yǎng)計(jì)劃。2019年碧云天榮獲江蘇省雙創(chuàng)人才創(chuàng)業(yè)類第一名，2020年碧云天團(tuán)隊(duì)榮獲江蘇省雙創(chuàng)團(tuán)隊(duì)創(chuàng)業(yè)類最高資助。2020年1人榮獲上海市五四青年獎(jiǎng)?wù)�，多人獲G60科創(chuàng)走廊優(yōu)秀人才獎(jiǎng)勵(lì)。2021年2人次入選國(guó)家級(jí)領(lǐng)軍人才，2022年1人次入選國(guó)家級(jí)創(chuàng)新人才。截止2022年12月，已有累計(jì)超過150000篇注明使用碧云天產(chǎn)品的研究論文發(fā)表在包括Cell、Nature、Science等國(guó)際高水平學(xué)術(shù)期刊。Beyotime品牌年度文獻(xiàn)引用率國(guó)內(nèi)領(lǐng)先，并躋身全球20強(qiáng)。碧云天將繼續(xù)致力于科研用技術(shù)和產(chǎn)品的研發(fā)，用我們最頂尖的技術(shù)、最成熟的產(chǎn)品、最熱情的服務(wù)，服務(wù)生命科學(xué)，造福人民健康！
