產品簡介：
來源 用途 交叉反應性 抗體識別位點 p65分子量
Rabbit WB, IP, IF, IHC H, M, R p65 N-terminal ～65kD
WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence; IHC, Immunohistochemistry.
H, human; M, mouse; R, rat.
 本NF-κB p65抗體(NF-κB p65 antibody)為進口分裝，用人工合成的人NF-κB p65氨基端(N-terminal)的一段多肽進行適當修飾后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽親和柱經過兩步純化而得到的高純度抗體。
 NF-κB是一種常見的轉錄因子，可以被炎癥因子、生長因子或趨化因子等激活。常見的炎癥因子(包括Interleukin-1和TNF-α等)都可以激活NF-κB。NF-κB由兩類亞基形成同源或異源二聚體。一類亞基包括p65(也稱RelA)、RelB和C-Rel；另一類亞基包括p50和p52。最常見的NF-κB亞基組成形式為p65/p50或p65/p65。
 NF-κB未被激活時和IκB-α形成一個復合物，分布在細胞漿中。在炎癥因子、生長因子或趨化因子等可以激活NF-κB的刺激存在的情況下，IκB-α會在Ser32和Ser36被磷酸化，隨后被泛素-蛋白酶體途徑降解。NF-κB和IκB-α解聚后，其核定位序列被暴露，從而被轉運到細胞核內促進NF-κB依賴的基因轉錄。通過免疫染色檢測NF-κB的主要亞基p65是否被轉移到細胞核內，就可以判斷NF-κB是否被激活�；蛘咛崛〖毎�核蛋白通過Western檢測細胞核內p65是否增加，也可以判斷NF-κB是否被激活。
 本NF-κB p65抗體僅識別p65，不識別RelB、C-Rel、p50和p52。
 配套提供了Western一抗稀釋液，可以用于Western檢測時的一抗稀釋。
 建議抗體使用時的稀釋比例如下(實際使用時需根據抗原水平的高低作適當調整)：
WB IP IF IHC
1:500-1000 1:200-500 1:500-1000 1:200-500
 本抗體如果用于常規的Western檢測或免疫熒光染色，至少可以檢測40次。
包裝清單：
產品編號 產品名稱 包裝
AN365-1 NF-κB p65抗體 40μl
AN365-2 Western一抗稀釋液 40ml
－ 說明書 1 份
保存條件：
NF-κB p65抗體-20℃保存，Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。
注意事項：
 對于本NF-κB p65抗體，Western blot檢測時一抗需4℃緩慢搖動過夜，如果僅短時間與一抗孵育，檢測效果較差。
 在Western或免疫熒光染色等操作后，請注意回收稀釋的抗體�；厥盏目贵w在進行Western或免疫熒光染色時至少可以重復使用10次。稀釋后的抗體4℃保存。
 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1. Western檢測：
A. 按照1:500-1000用碧云天提供的Western一抗稀釋液稀釋NF-κB p65抗體。
B. 把經過封閉的蛋白膜與稀釋好的一抗4℃緩慢搖動過夜，確保稀釋的抗體至少能在搖動的瞬間覆蓋蛋白膜。
C. 回收稀釋的一抗以備下次繼續使用。
D. 按照Western的實驗步驟進行后續的洗滌、二抗孵育、洗滌和檢測等操作。具體操作可以參考如下網頁：
http://www.beyotime.com/western.htm
2. 免疫熒光染色：
可以使用碧云天生產的(P0103)免疫染色一抗稀釋液稀釋抗體，使用后注意回收稀釋好的一抗，具體操作可以參考如下網頁： http://www.beyotime.com/immunol-staining.htm
3. 其它實驗操作請自行參考適當的protocol進行。