產品簡介:
Ø Western及IP細胞裂解液(cell lysis buffer for Western & IP),是一種在非變性條件下裂解細胞的裂解液。本細胞裂解液裂解的細胞,可以用于PAGE,Western,免疫沉淀(immnol precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)。
Ø Western及IP細胞裂解液的主要成分為20mM Tris (pH 7.5),150mM NaCl,1% Triton X-100,以及EDTA,EGTA,sodium pyrophossphate,β-glycerophosphate,Na3VO4,leupeptin等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白的降解,并維持原有的蛋白間相互作用。
Ø Western及IP細胞裂解液不僅可以用于培養細胞的裂解,也可以直接用于大多數組織的裂解。
包裝清單:
Western及IP細胞裂解液 100ml
說明書 1 份
保存條件:
-20℃保存,一年有效。
注意事項:
Ø 為取得最佳的使用效果,盡量避免過多的反復凍融。可以適當分裝后使用。
Ø 需自備PMSF。
Ø 裂解蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進行。
Ø 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
對于培養細胞樣品:
1. 融解Western及IP細胞裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入PMSF至最終濃度為1mM。
2. 如果是貼壁細胞,按照6孔板每孔加入100微升裂解液的比例(即細胞培養液量的1/20)加入裂解液。如果是懸浮細胞,離心收集細胞后,也按照6孔板每孔加入100微升裂解液的比例(即細胞培養液量的1/20)加入裂解液。
3. 充分裂解后,10000-14000rpm離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
對于組織樣品:
1. 把組織剪切成細小的碎片。
2. 融解Western及IP細胞裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入PMSF至最終濃度為1mM。
3. 按照每約每20毫克組織加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000rpm離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈vortex使裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
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碧云天由在哈佛大學工作和學習的留學人員創辦于2001年。20余年來專注于自主研發和生產。2007年成立上海碧云天生物技術有限公司,為國家級專精特新“小巨人”企業,并進一步入選第二批第一年建議支持的國家級專精特新“小巨人”企業,也是上海市科技小巨人企業、G60科創走廊一類重點扶持企業、上海市高新技術企業和上海市專精特新中小企業。江蘇碧云天為江蘇省高新技術企業,南通市雙創優企。公司主要研發生產生物、醫學研究用試劑、試劑盒、消耗品和儀器設備,同時提供生命科學研究的技術服務和一站式實驗儀器設備采購平臺。公司核心團隊由來自美國哈佛大學、NIH、香港大學、中國科學院等國內外著名大學和科研機構的高水平科研人員及諾華、默克等頂尖醫藥企業的管理人員組成。2016年1人獲國務院政府特殊津貼,2人入選“松江區優秀人才”;2019年1人入選國家百千萬人才工程,1人入選上海市領軍人才,6人獲G60科創走廊優秀人才獎勵,3人入選長三角G60科創走廊科技精英,3人入選上海市松江區拔尖人才培養計劃。2019年碧云天榮獲江蘇省雙創人才創業類第一名,2020年碧云天團隊榮獲江蘇省雙創團隊創業類最高資助。2020年1人榮獲上海市五四青年獎章,多人獲G60科創走廊優秀人才獎勵。2021年2人次入選國家級領軍人才,2022年1人次入選國家級創新人才。截止2022年12月,已有累計超過150000篇注明使用碧云天產品的研究論文發表在包括Cell、Nature、Science等國際高水平學術期刊。Beyotime品牌年度文獻引用率國內領先,并躋身全球20強。碧云天將繼續致力于科研用技術和產品的研發,用我們最頂尖的技術、最成熟的產品、最熱情的服務,服務生命科學,造福人民健康!