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Western及IP細胞裂解液
英文名稱:總訪問:11260
國產/進口:國產半年訪問:99
產地/品牌:碧云天生物技術研究所產品類別:分子生物學試劑
規       格:P0013(100毫升) 最后更新:2018-4-26
貨       號:
CAS   號:
參考報價:158.00元
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  • 產品介紹
  • 公司簡介

產品簡介:
Ø Western及IP細胞裂解液(cell lysis buffer for Western & IP),是一種在非變性條件下裂解細胞的裂解液。本細胞裂解液裂解的細胞,可以用于PAGE,Western,免疫沉淀(immnol precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)。
Ø Western及IP細胞裂解液的主要成分為20mM Tris (pH 7.5),150mM NaCl,1% Triton X-100,以及EDTA,EGTA,sodium pyrophossphate,β-glycerophosphate,Na3VO4,leupeptin等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白的降解,并維持原有的蛋白間相互作用。
Ø Western及IP細胞裂解液不僅可以用于培養細胞的裂解,也可以直接用于大多數組織的裂解。

包裝清單:
Western及IP細胞裂解液 100ml
說明書 1 份

保存條件:
-20℃保存,一年有效。

注意事項:
Ø 為取得最佳的使用效果,盡量避免過多的反復凍融。可以適當分裝后使用。
Ø 需自備PMSF。
Ø 裂解蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進行。
Ø 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用說明:
對于培養細胞樣品:
1. 融解Western及IP細胞裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入PMSF至最終濃度為1mM。
2. 如果是貼壁細胞,按照6孔板每孔加入100微升裂解液的比例(即細胞培養液量的1/20)加入裂解液。如果是懸浮細胞,離心收集細胞后,也按照6孔板每孔加入100微升裂解液的比例(即細胞培養液量的1/20)加入裂解液。
3. 充分裂解后,10000-14000rpm離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

對于組織樣品:
1. 把組織剪切成細小的碎片。
2. 融解Western及IP細胞裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入PMSF至最終濃度為1mM。
3. 按照每約每20毫克組織加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000rpm離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈vortex使裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

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