產品簡介：

Ø Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒，是一種基于WST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。

Ø WST-8是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan(參

考圖1)。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。

圖1. WST-8檢測原理圖 (EC=electron coupling reagent，即電子耦合試劑 )

Ø WST-8是MTT的一種升級替代產品，和MTT或其它MTT類似產品如XTT、MTS等相比有明顯的優點。首先，MTT被線粒體內的一些脫氫

酶還原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液來溶解；而WST-8和XTT、MTS產生的formazan都是水溶性的，可以
省去后續的溶解步驟。其次，WST-8產生的formazan比XTT和MTS產生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更穩定，
使實驗結果更加穩定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比，線性范圍更寬，靈敏度更高。
Ø WST-8和WST-1相比，檢測靈敏度更高，更易溶解，并且更加穩定。

Ø 本試劑盒可以用于細胞因子等誘導的細胞增殖檢測，也可以用于抗癌藥物等對細胞有毒試劑誘導的細胞毒性檢測，或一些藥物誘

導的細胞生長抑制檢測。
Ø 本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經配制好的含有WST-8的CCK-8溶液，無須再進行任何配制等操作。無須使用同位素，所

有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內完成。不必洗滌細胞，不必收集細胞，也不必采用額外的步驟去溶解formazan�？梢杂糜诖笈�
量樣品的檢測。
Ø 酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。

Ø WST-8對細胞無明顯毒性。加入WST-8顯色后可以在不同時間反復用酶標儀讀板，使檢測時間更加靈活，便于找到最佳測定時間。

Ø 關于不同細胞增殖和細胞毒性檢測試劑盒的比較和選擇，請參考 http://www.beyotime.com/mtt-comp.htm 。

Ø 本試劑盒可以測定500個樣品。


包裝清單：

產品編號 產品名稱 包裝
C0038 CCK-8溶液 5 ml
— 說明書 1 份




保存條件：

4℃避光保存一年有效，-20℃避光保存兩年有效。




注意事項：

Ø 由于使用96孔板進行檢測，如果細胞培養時間較長，一定要注意蒸發的問題。一方面，由于96孔板周圍一圈最容易蒸發，可以采

取棄用周圍一圈的辦法，改加PBS，水或培養液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養箱內水源的地方，以緩解蒸發。

Ø 本試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化的反應，如果待檢測體系中存在較多的還原劑，例如一些抗氧化劑會干擾檢測，需設法去除。

Ø 用酶標儀檢測前需確保每個孔內沒有氣泡，否則會干擾測定。

Ø 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。



使用說明：

1. 通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目，
需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等因素決定)。按照實驗需要，進行培養并給予0-10微升特定的藥物刺激。
2. 每孔加入10微升CCK-8溶液。如果起始的培養體積為200微升，則需加入20微升CCK-8溶液，其它情況以此類推�？梢杂眉恿讼�

應量細胞培養液和CCK-8溶液但沒有加入細胞的孔作為空白對照。如果擔心所使用的藥物會干擾檢測，需設置加了相應量細胞培

養液、藥物和CCK-8溶液但沒有加入細胞的孔作為空白對照。
3. 在細胞培養箱內繼續孵育0.5-4小時，對于大多數情況孵育1小時就可以了。時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情

況而定，初次實驗時可以在0.5、1、2和4小時后分別用酶標儀檢測，然后選取吸光度范圍比較適宜的一個時間點用于后續實驗。
4. 在450nm測定吸光度。如無450nm濾光片，可以使用420-480nm的濾光片�？梢允褂么笥�600nm的波長，例如650nm，作為參考波

長進行雙波長測定。



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